姜黄素通过调控miR-21/PTEN通路抑制人肺腺癌A549细胞增殖的实验研究

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目的:姜黄素,一种天然植物化学物质,已被证实具有强效抗癌活性,本研究试图确定姜黄素对于人类非小细胞肺癌细胞的细胞毒作用的分子机制。方法:将不同浓度姜黄素处理人肺腺癌A549细胞48h,光镜下观察细胞形态及增殖情况,使用MTS法检测其对细胞增殖的影响。q RT-PCR法测定经不同浓度的姜黄素处理48h后的A549细胞中micro RNA-21的表达情况。使用脂质体转染法将mi R-21 mimic或PTEN的小干扰RNA转染到A549细胞,使mi R-21过表达或PTEN基因沉默,再经姜黄素处理48h后,使用Western Blot法检测A549细胞中PTEN蛋白的表达情况。结果:相较于未经姜黄素处理的A549细胞,浓度介于20-40μM之间的姜黄素可以呈浓度依赖性的抑制A549细胞增殖,其抑制效果具有统计学差异(p<0.05),且以浓度为30μM抑制效果开始明显显著(p<0.01);经姜黄素处理过的细胞对micro RNA-21的表达产生了一种呈浓度依赖性的抑制效果(p<0.05)。此外,PTEN,已被证明为micro RNA-21的一个靶点,其蛋白水平由Western Blot法测定,转染了mi R-21 mimic或PTEN小干扰RNA的A549细胞,对比于阴性对照组,其PTEN蛋白水平下降明显,其差异具有统计学意义(p<0.05)。而与相应未经姜黄素处理组比较,PTEN蛋白水平在经姜黄素处理过的A549细胞中明显升高(p<0.05)。结论:姜黄素对人肺腺癌A549细胞有明显的抑制增殖作用,且其抑制作用呈浓度依赖性;mi R-21/PTEN通路可能参与了姜黄素抗肺癌机制。
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