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反刍动物瘤胃微生物对饲料纤维素、蛋白质等物质进行发酵为机体提供能量,但同时产生甲烷、氨态氮等物质,不仅造成饲料能量损失而且造成环境污染。因此,国内外学者一直致力于反刍动物瘤胃内微生物区系及瘤胃发酵的研究,其目的是想通过调控瘤胃内微生物区系来调控瘤胃发酵进而调控动物生长性能。本试验以天然植物提取物茶皂素作为试验材料,研究不同剂量的茶皂素对荷斯坦奶牛瘤胃发酵的指标、瘤胃微生物区系与产奶性能的影响。1、茶皂素对奶牛瘤胃发酵指标及瘤胃微生物数量的影响本试验旨在研究茶皂素对奶牛瘤胃发酵及瘤胃微生物数量的影响。试验选用12头健康状况良好,体重相似的荷斯坦奶牛,随机分为4个组,分别在TMR基础饲粮上灌服0(对照组)、20、30、40 g/d茶皂素,茶皂素溶于水后灌服,进行预试期14 d,正试期35 d的饲养试验。正试期期间每隔7 d,于晨饲前1h用口腔采样器采集瘤胃液测定瘤胃发酵指标,用qRT-PCR测定瘤胃微生物数量。结果表明:1)与对照组相比,茶皂素显著降低了瘤胃pH值、氨态氮的浓度(P<0.05),但均未超过正常范围值,显著提高了微生物蛋白产量、丙酸浓度和丁酸浓度(P<0.05),30g/d茶皂素组的微生物蛋白产量提高了20.20%,但对挥发性脂肪酸总含量和乙酸浓度的影响不显著(P>0.05)。2)与对照组相比,茶皂素各组的瘤胃原虫、溶纤维丁酸弧菌的数量均显著降低(P<0.05),甲烷菌、白色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌没有显著变化(P>0.05),黄色瘤胃球菌、真菌数量差异不显著(P>0.05),但随着茶皂素剂量的增加,黄色瘤胃球菌有先增后减的趋势。综上所述,饲料中添加茶皂素改变了奶牛瘤胃发酵模式,并显著影响了奶牛瘤胃微生物区系。2、茶皂素对奶牛瘤胃细菌、原虫区系的影响取试验一所得的瘤胃液样品1.5 mL采用珠磨-CTAB法提取瘤胃液总DNA,采用DGGE电泳,同时结合16SrDNA序列分析技术研究奶牛瘤胃细菌、原虫区系的变化。结果表明:1)与对照组相比,添加茶皂素组的瘤胃细菌的丰富度、香浓指数、均一性指数和优势度指数均差异不显著(P>0.05),但增加了瘤胃细菌的丰富度和香浓指数,茶皂素增加了普氏菌属的细菌的数量。2)与对照组相比,添加茶皂素组的瘤胃原虫的丰富度和香浓指数均显著降低(P<0.05),优势度指数显著增加(P<0.05),均一性指数差异不显著(P>0.05),茶皂素减少了前庭亚纲、内毛目的原虫数量。综上所述,饲料中添加茶皂素增加了瘤胃细菌的多样性,降低了瘤胃原虫的多样性,抑制原虫生长。3、茶皂素对奶牛生产性能的影响试验三选用20头健康状况良好,体重相似的荷斯坦奶牛,随机分为4个组,与试验一处理相同,正试期内每天记录试验奶牛早、中、晚的产奶量,正试期期间每隔7d采集早、中、晚(4:3:3)奶样50 mL,测定乳成分和体细胞数。结果表明:与对照组相比,添加茶皂素各组显著降低了牛乳中的乳糖率,40g/d茶皂素组显著降低了产奶量和乳脂校正乳(P<0.05),20、30 g/d茶皂素组有增加产奶量和乳脂校正乳的趋势(P>0.05),添加茶皂素各组有增加牛乳中乳脂率、降低体细胞数的趋势(P>0.05)。综上所述,20、30g/d茶皂素有增加奶牛的产奶量和乳品质的趋势,添加40 g/d茶皂素降低奶牛的产奶量和乳品质。