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植物体内存在着具有促进植物生长的内生细菌,可用于开发微生物肥料,具有促进植物生长、无污染、低成本等优点。水黄皮是一种生物质能源植物,具有耐高温、耐旱、耐贫瘠、耐盐碱等特性。本研究从采自海南省文昌县红树林的水黄皮(Pongamia pinnata)根中分离内生细菌,应用BOX-PCR和16S rDNA全序列分析等方法对其多样性和系统发育进行了研究。利用Salkowski比色法测定IAA的分泌量、用钼锑抗比色法测定溶解无机磷的能力、采用改进的CAS法测定分泌铁载体的能力、利用Ashby培养基和过硫酸钾氧化法测定自生固氮能力,进而,通过盆栽试验研究了供试细菌的促生能力。研究结果如下：1.从水黄皮根中分离出50株内生细菌,BOXAIR-PCR聚类分析和16S rDNA系统发育分析表明,水黄皮根内生细菌具有丰富的遗传多样性。BOXAIR-PCR聚类分析结果表明,50株内生细菌在82%的相似水平上聚为6个遗传群,其中I群包含了58%的菌株；而另外,有7株菌独立成群。2.根据BOXAIR-PCR聚类分析结果,测定了13株代表菌株的16S rDNA序列,构建了供试菌株的系统发育树,表明水黄皮根内生细菌主要分布于芽孢杆菌属(Bacillus)、赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)、苍白杆菌属(Ochrobactrum)6个属,并揭示了水黄皮根内生细菌具有丰富的遗传多样性,且与已知同源菌属的同源性高(99.2%100%)。鉴定结果表明,代表菌株G3、G16和G17属于Bacillus aryabhattai, G4和G6属于Bacillus thuringiensis,G9属于Burkholderia anthina,G10和G26属于Ochrobactrum anthropi,G14属于Paenibacillus glycanilyticus、G35属于Corynebacterium callunae,G36属于Lysinibacillus fusiformis、G39属于Bacillus subtilis,而G50属于Bacillus cereus。3.通过对代表菌株的生物活性测定,获得了产IAA、溶磷、分泌铁载体和自生固氮的内生细菌。结果表明,13代表菌株均产生IAA(17.55-59.55μg/mL),以G16产量最高,为59.55 μg/mL;有76.9%的代表菌株能分泌铁载体,铁载体浓度为6.00-104.50μg/mL,菌株G26产量最高,为104.50μg/mL;G9具有溶无机磷能力,其溶磷量为4.87μg/mL;G9、G14、G10和G26具有自生固氮能力,固氮量为1.57～6.84μg/mL,以G10固氮能力最强,培养液中全氮量达到6.84μg/mL。对G3、G9和G10进行水黄皮盆栽接种试验,结果表明这3株PGPB能够不同程度地促进水黄皮的生长,其中G10的促生效果最明显,水黄皮植株干重和植株含氮量较对照显著增加。4.筛选获得了5株产铁载体能力强的内生细菌(G3、G9、G10、 G17和G26),其产铁载体的浓度为41.50～104.50μg/mL;进而,盆栽试验验证了这5株内生细菌对花生的促生效果。结果表明,接种供试菌株促进了花生吸收N、P、K和Fe元素,增加花生植株干重。其中,接种GIO和G26,花生干重增加了6.78和23.72%、植株全氮量增加96.94%和76.53%,植株全磷量增加了17.71%和20.83%,植株全钾含量增加了16.15%和14.91%,植株全铁增加了32.14-73.45%。这证明了供试菌株具有良好的促生功能。