橙皮苷、甘草双胺盐、甘草提取物对UVB诱导的豚鼠色素沉着抑制作用的研究

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研究背景随着年龄的增长和自然环境因素的影响,皮肤的色泽会变暗黄并出现各种色素沉着斑,如黄褐斑、炎症后色素沉着等,给人们的生活工作带来一定的困扰,其造成色泽变暗的原因有:(1)皮肤中黑素颗粒的增加,肤色变黑,对于光的反射减少;(2)皮肤中毛细血管数量减少,减低了皮肤中红润的成分。而其中影响皮肤色泽改变的最主要因素是皮肤表皮基底层黑素的增多。黑素是决定肤色的最主要成分,能保护皮肤免受紫外线的辐射损害,黑素主要由黑素细胞合成,其合成过程是一个多步骤的酶促生化反应,有着复杂而精确的调控。目前有关黑素合成的研究主要是围绕酪氨酸家族成员的调节展开的。黑素合成的速率与酪氨酸酶的量和活性直接密切相关。自1961年以来,氢醌成为最受欢迎的美白成分之一,但由于其对皮肤细胞的毒性作用而逐渐受到限制,市场需要更多安全性高的新的成分用于治疗色素沉着性疾病。近年来,从天然植物中筛选出来的安全而有效的成分倍受人们的亲睐。如植物中的类黄酮,在自然界中广泛存在,价格低廉、提取工艺简单,且具有很多潜在的药理学作用。我科博士在体外研究发现中药甘草的乙醇提取物对蘑菇酪氨酸酶活性有明显的抑制作用。18α-甘草酸双胺盐对体外培养的B16F10鼠黑素瘤细胞的黑素生成有抑制作用,提示18α-甘草酸双胺盐有可能成为一种无细胞毒作用的酪氨酸酶抑制型皮肤脱色剂。我科岳学状博士曾观察了不同浓度的橙皮苷及甘草对人原代黑素细胞的影响,结果提示,橙皮苷、甘草均能显著抑制黑素合成和酪氨酸酶活性,且呈浓度依赖性,相对氢醌较为安全。本课题将在以上实验的基础上观察橙皮苷、甘草酸双胺盐及甘草提取物在活体上抑制黑素形成的作用。采用豚鼠为研究对象,建立UVB照射诱导形成的色素沉着的皮肤模型,观察橙皮苷、甘草这类生物类黄酮物质是否有减少黑素形成的作用,并且探讨其作用机理。目的研究中药橙皮苷、甘草酸双胺盐及甘草提取物对皮肤色素沉着的抑制作用,为其治疗色素沉着性皮肤病提供实验依据。方法选定橙皮苷、甘草提取物、甘草酸双胺盐三种中药成分制成不同浓度的乳膏,以氢醌为阳性对照组,单乳膏为阴性对照组,外用于棕黄色豚鼠UVB照射诱导皮肤色素沉着的实验动物模型,采用HE、Schmor1、Imokawa等方法染色,观察外用上述中药后黑素细胞数量和形态的变化。结果橙皮苷、甘草提取物、甘草酸双胺盐均使多巴阳性的黑素细胞及含黑素颗粒的细胞数较阴性对照组明显减少(P<0.05),其中3%、4%橙皮苷与阳性对照组3%氢醌外用差异无显著性(P>0.05)。结论橙皮苷、甘草提取物和甘草双胺盐对UVB诱导的色素沉着具有抑制作用。
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