赫依热症小鼠模型的建立研究

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目的:1.通过蒙医理论指导下建立蒙医“粘疫”感染小鼠发热模型。2.建立赫依热症小鼠模型及其诊断标准。方法:预实验:将54只KM小鼠随机分为低剂量、中剂量、高剂量组、空白组。低、中、高剂量组各16只,空白组6只。低、中、高剂量组腹腔注射0.05ml 10%水合氯醛浅麻醉,等麻药起效后采用肺炎链球菌低剂量(3× 106 CFU/ml,0.5μl/只),中剂量(3 × 107 CFU/ml,0.5μl/只),高剂量(1.5 × 108 CFU/ml,0.5μl/只)鼻腔滴注法造发热模型。造模后每隔2小时测一次体温,对照观察发热高峰值、发热时程及症状变现。三种剂量组发热模型基础上给予蒙医促使“赫依”增盛的“四施干预”,空白组正常饲养(足量饲料、饮用水)。观察症状变化,归纳赫依热症症状并建立赫依热症小鼠模型的诊断表格。通过对照观察体温,症状变化确定肺炎链球菌中剂量(3×107 CFU/ml,0.5 μ 1/只)为实验选择剂量。正式实验:1.赫依热症模型组与发热模型组腹腔注射0.05ml 10%水合氯醛浅麻醉,等麻药起效后采用鼻腔滴注法滴注肺炎链球菌(3 × 107 CFU/ml,0.5μl/只),空白组正常饲养。检测小鼠体温、观察症状变化。2.建立蒙医赫依热症模型:在赫依热模型组小鼠发热基础上给予蒙医促使“赫依”增盛的“四施干预”,包括:行为干预(惊吓:70-80bB重金属噪音),饮食干预(浓茶:5g茶+400ml水煮至沸腾,放置变凉;荞面:平时饮食量2/3,18g荞面加适量常温饮用水和至柱状),疗术干预(每日一次尾静脉放血0.05ml)。发热模型组与空白组正常饲养(足量饲料、饮用水),不予特殊干预。3.通过观察症状变化,归纳赫依热症症状表现及ELAISA方法检测各组血清中IL-1、IL-6、TNF-α、CRP、cTnT等含量,确定小鼠赫依热症模型及其诊断标准。结果:造发热模型后,赫依热症模型组与发热模型组体温分别 11h、10h开始发热,约20h时达高峰,26h后体温开始逐渐下降至空白组体温水平。发热过程中出现精神、活动量、被毛、呼吸频率、进食进水量、尿色与气味、粪便颜色与软硬度等方面的规律性变化,其发热期的症状变化符合蒙医温病学成熟热证期临床症状表现。在赫依热症模型组小鼠发热模型基础上持续7天给予促使“赫依”增盛的“四施干预”后出现被毛直耸;耳部、鼻子、尾部颜色变浅;一般状态呈敏感、易受惊、活动量增多、幅度变大;失眠;饮水量较少;尿色清澈,气味淡;粪便量少、形状变小、质地硬,气味淡等表现,这些症状变化跟蒙医温病理论描述的赫依热症症状及赫依热症小鼠模型诊断表格中的症状相吻合。血清中IL-1、IL-6、TNF-α、CRP、cTnT含量的检测:与空白组比较发热模型组TNF-α及赫依热症模型组IL-6、TNF-α、CRP、cTnT含量结果有显著性差异(P<0.05)。与发热模型组比较,赫依热症模型组IL-6、cTnT含量结果有显著性差异(P<0.05)。结论:1.肺炎链球菌鼻腔滴注造模方法在实验操作中易操作、发热反应均一、高热峰值适宜、发热时程较长适合建立赫依热症小鼠模型。2.实验给予的蒙医理论促使“赫依”增盛的干预,可以对发热病程中增盛“赫依”致使其演变成赫依热症。3.本次实验能够为蒙医温病学赫依热症病机及相关蒙药研究提供合理的模型。
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