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目的通过对安徽地区多医疗中心临床标本分离的鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)的耐药性研究、耐药基因检测。了解该地区菌株的耐药性特征,耐药菌株医院感染的流行状况,为临床医务工作者抗菌药物的合理使用提供一定参考,为防止医院感染、耐药菌株的传播提供实验室基础,也为规范临床操作提供理论依据。材料与方法菌株来源实验研究中所选用的540株非重复鲍曼不动杆菌,分离自2015年9月及2016年9月两个时间段内安徽地区38家三级医院住院患者的各类临床标本。菌株符合《医院感染诊断标准》(剔除一周内同一患者相同部位重复分离到的相同细菌)。标本来源大多为病人体液(痰液、尿液,分泌物等),少量为病人血液。药敏实验的质控菌株(大肠埃希菌ATCC 25922,铜绿假单胞菌ATCC 27853)来自安徽省细菌耐药监测实验室保存。方法1.2015年9月及2016年9月这两个时间段内安徽地区38家三级医院住院患者共收集非重复鲍曼不动杆菌540株,经安徽医科大学第一附属医院VITEK-2Compact全自动微生物鉴定仪及API20试纸条鉴定460株。2.美国临床实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standard,CLSI)推荐的MH琼脂倍比稀释法测定临床标本分离的460株非重复鲍曼不动杆菌对16种抗菌药品的敏感性。3.根据琼脂倍比稀释法测定的最低抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)筛选出312株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(Carbapenem-resistant Acinetobacter baumanni,CRAB)。4.再从筛选的312株CRAB中挑选出在2015年9月及2016年9月这两个时间段内安徽地区38家三级医院中均检出CRAB相同或不同科室的同一家医院,11所,145株菌作为耐药基因检测及脉冲场凝胶电泳(Pulsed field gel electrophoresis,PFGE)的研究对象。5.对挑选出的145株CRAB,PCR检测包括A类KPC基因;B类bla VIM,bla IMP,bla NDM,bla SIM基因,D类bla OXA-23,bla OXA-24,bla OXA-51,bla OXA-58耐药基因的携带情况。采用PFGE手段对145株CRAB的同源性进行追踪、鉴定,分析。结果1.研究结果显示,460株非重复鲍曼不动杆菌对CSLI推荐的16种抗菌药品中的14种保持着较高的耐药性。其中多黏菌素B的耐药率最低,为0.43%;其次为米诺环素耐药率为32.2%;剩余药物的耐药率均大于54%。其中对头孢类抗生素耐药率均在70%以上,对碳青霉烯类药物亚胺培南(IPM)/美罗培南(MEM)的耐药率分别为67.9%/70.6%。460株AB中CRAB为312株。2.312株CRAB均为多重耐药菌株,也同时对头孢菌素类、青霉素类、氨基糖苷类,氟喹诺酮类,磺胺类,四环素类2种及以上耐药。3.对312株CRAB中挑选的145株菌进行耐药基因型检测发现,100%(145/145)检出bla OXA-51,92.41%(134/145)检出bla OXA-23,0.69%(1/145)检出bla OXA-24,2.76%(4/145)检出金属酶bla IMP-4基因亚型,余耐药基因型均未检出。PFGE分为80个不同的型别(PT1-PT80),其中60个型别只包含1株菌,其余20个带型包含菌株数大于1株。结论1.AB已成为安徽区域内医院感染的重要病原菌之一,其耐药性强,对除多黏菌素B,米诺环素外的临床常用药物的体外药敏试验均不佳,耐药率大于54%,高于全国平均水平(50%)。安徽地区是AB耐药严重的省份之一。2.检测出的CRAB均呈现多重耐药,其IPM、MEM的耐药率较近年CHINET数据呈上升趋势。部分CRAB呈泛耐药形式出现,限制了临床治疗。3.实验研究中收集的145株CRAB,100%检出bla OXA-51基因,证实了该基因为AB染色体上的固有耐药基因,可用作菌株的鉴别。bla OXA-23是安徽地区细菌最为流行的碳青霉烯酶基因,也是耐药性传播的主要基因型。PFGE对145株CRAB追踪和鉴定同源性发现11家医院均存在着不同的院间、院内、科间,科内传播。CRAB的医院感染普遍存在。