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奶牛乳房炎是对全球奶牛养殖业影响最大的疾病,导致牛奶产量和质量显着下降。奶牛乳房炎是由多种病原体导致的,但金黄色葡萄球菌被认为是最常见的奶牛乳房炎病原体之一。由于金黄色葡萄球菌的致病性、传染性和对抗菌药物治疗的耐药性以及对粮食安全和公共卫生相关的关键问题,它是一种极为关键的病原体。为了解宁夏某牛场引发奶牛乳房炎的致病菌,本研究采集该奶牛场罹患临床型乳房炎奶牛乳样52份,采用Baid-park选择性培养基分离纯化细菌,革兰染色镜检、生化试验、16sr DNA序列分析鉴定疑似菌株。采用琼脂纸片扩散法（KB法）对细菌进行药敏试验,利用PCR反应检测分离株中携带的耐药基因、mec A基因和毒力基因,通过动物致病性试验探究分离菌株的致病性强弱。结果显示:Baid-park选择性培养基分离纯化得到29株疑似金黄色葡萄球菌;革兰染色、生化试验、16sr DNA序列分析得到29株疑似菌株为金黄色葡萄球菌。药敏试验显示:所有金黄色葡萄球菌多重耐药率达到68.9%,万古霉素的敏感率为100%,左氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星的敏感率分别达到89.65%、75.90%、65.52%,氨曲南和青霉素的耐药率达到了89.65%和68.97%。耐药基因检测结果显示:磺胺类耐药基因sul1和sul2的检出率均为100%,β-内酰胺类耐药基因pbp1A、pbp2B和TEM的检出率分别为65.5%、41.4%和0,氯霉素类耐药基因cat A3的检出率为51.8%,其他类耐药基因检出率较低。毒力基因检测结果显示:nuc、coa的检出率为100%,clfa的检出率为86.2%,spa的检出率为34.5%,hlb、sea、seg、sak、set1、Fn BPA、PVL、Fn BPB的检出率较低。动物致病性试验结果显示:所有分离株注射小鼠后出现不同程度的发病症状,其中HL8组小鼠在18h内全部死亡,无菌采集内脏器官,分离内脏细菌,经鉴定与注射菌株同源性100%。刨检发现内脏器官出现充血、出血及肿胀,对照组小鼠无明显发病症状。毒力基因组合因菌种不同而存在差异,选择具有免疫原性的clfa基因,成功构建出p ET32a-clfa原核表达载体,纯化重组蛋白,免疫新西兰大白兔,分离4免血清作为抗体,进一步研究治疗金黄色葡萄球菌性乳房炎的特效疫苗。本试验为宁夏地区金黄色葡萄球菌引起的临床型乳房炎的防治提供了参考。