糖尿病与原位大隐静脉病变的相关性研究

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研究目的通过对血管物理特性、生物稳定性、血管显微结构成份及炎性蛋白的表达与分布的综合、全面分析,证实糖尿病对原位大隐静脉的血管病变具有影响作用,并初步探讨TNFAIP8家族在糖尿病对原位大隐静脉病变作用中的影响。从而有效的指导判定临床大隐静脉血管取材的质量,判断血管移植预后情况,并为提升大隐静脉血管桥远期通畅率提供新的思路和方法。研究方法以新鲜的大隐静脉标本(CABG术中留取,血管长度4cm)作为研究对象,按患者其健康状况分为正常对照组(NG组)与糖尿病组(DG组)。对每组每条血管均进行:1.血管物理特性相关检测对各组血管行组织含水量、血管热皱缩温度及血管断裂强度检测,通过各组血管各项指标的差异性表达,观察评价各组血管物理特性,评估糖尿病对原位大隐静脉的物理性能影响。2.血管细胞与组织学形态特征检测对各组血管行常规HE染色及血管中膜结缔组织Masson三色染色,定性定量检测血管中膜结缔组织弹性纤维含量(RE)、胶原纤维含量(RC)、管壁僵硬度(C/E)及血管中膜结缔组织基质在环行平滑肌中的体积密度(CC/MC),通过各组血管各项指标的差异性表达,观察评价各组血管生物学稳定性及显微结构成份,评估糖尿病对原位大隐静脉的细胞与组织学形态特性影响。3.免疫组织化学法检测TNFAIP8及TIPE2在原位大隐静脉中的表达及分布采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(Streptavidin Peroxydase Conjugated Method, SP法),对各组血管检测炎性蛋白因子TNFAIP8及TIPE2的表达及分布,观察评价各组血管蛋白TNFAIP8家族的差异性表达,探讨糖尿病对原位大隐静脉血管炎性反应病变影响。结果(1)各组血管组织含水量NG组略高于DG组,NG组、DG组之间无差别(P>0.05),无统计学意义。(2)各组血管热皱缩温度NG组的热皱缩温度高于DG组(0.01<P<0.05)有差别但差异无显著性。(3)各组血管断裂强度NG组的热皱缩温度显著高于DG组(P<0.01)差异具有显著统计学意义。(4)光学显微镜下观察,评价各组血管生物学稳定指数:NG组的生物学稳定指数明显高于DG组(P<0.01),差异具有显著的统计学意义。(5)各组血管弹性纤维含量(RE)NG组>DG组,差异具有统计学意义,NG组的弹性纤维含量高于DG组(0.01<P<0.05)。(6)各组血管胶原纤维含量(RC)DG组>NG组,差异具有统计学意义,DG组的胶原纤维含量高于NG组(0.01<P<0.05)。(7)各组血管管壁僵硬度(C/E)DG组的管壁僵硬度明显高于NG组(P<0.01),差别具有显著性,具有显著的统计学意义。(8)各组血管中膜结缔组织基质在环行平滑肌中的体积密度(CC/MC) DG组的体积密度明显高于NG组(P<0.01)差异具有显著的统计学意义。(9) TNFAIP8在原位大隐静脉中的表达及分布NG组TNFAIP8的表达与分布:血管外膜的表达为阴性,血管中膜的表达为中,度阳性,血管内膜表达为中度阳性,主要分布于中膜及血管内膜,血管外膜无表达;DG组TNFAIP8的表达与分布:血管外膜的表达为弱阳性,血管中膜的表达为中度阳性,血管内膜表达为强阳性,血管全层均有分布,且由血管外膜到血管内膜表达逐渐增高。TNFAIP8在各组血管中均有表达,DG组表达显著高于NG组;TNFAIP8在NG组与DG组呈弥散、粗大颗粒状密集分布,NG组血管外膜未见分布,DG组血管全层均有分布,且由血管外膜到内膜表达逐渐增高。(10) TIPE2在原位大隐静脉中的表达及分布NG组TIPE2的表达与分布与TNFAIP8类似:表现为血管外膜为阴性,血管中膜为弱阳性,血管内膜表达为中度阳性,其表达主要分布于血管中膜及血管内膜,血管外膜无表达;在DG组,血管外膜TIPE2的表达也为阴性,血管中膜的表达为中度阳性,但血管内膜表达为强阳性,表达主要分布于血管中膜及血管内膜,血管外膜无表达。因此可见:TIPE2在各组血管中均有表达,DG组表达显著高于NG组;TIPE2在NG组与DG组呈弥散、粗大颗粒状密集分布,均分布于血管中膜及血管内膜,血管外膜无分布。结论及意义通过对血管物理性能、血管显微结构成份、生物学性能及炎性蛋白的表达与分布各方面的检测,证实糖尿病对原位大隐静脉的血管病变具有影响作用,通过全面分析糖尿病致原位大隐静脉血管病变的相关因素,从而指导判定临床大隐静脉血管材料的质量,指导判断预后。探索糖尿病对原位大隐静脉病变的影响,为提高大隐静脉血管桥远期通畅率提供了新的思路和方法。本研究结论如下:(1)血管在热皱缩温度和断裂强度方面,NG组较DG组显示出了良好的物理特性。(2)血管生物学稳定性方面,NG组较DG组显示出了良好的生物学稳定性(3)血管显微结构成分方面,NG组的弹性纤维含量高于DG组;在胶原纤维含量、管壁僵硬度及血管中膜结缔组织基质在环行平滑肌中的体积密度方面,DG组明显高于NG组。因而推测:DG组血管平滑肌收缩功能降低及血管壁弹性降低,静脉易发生扩张。(4)TNFAIP8及TIPE2在静脉中的表达及分布方面,炎性蛋白在各组血管中均有表达,且DG组表达与分布均显著高于NG组。蛋白TNFAIP8及TIPE2对原位大隐静脉的血管病变具有影响作用,且DG组较NG组表现较显著。
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