目的:氧化应激是诱导性多能干细胞（i PSC）在培养和应用中遇到的一个关键问题,探讨其作用机制具有重要的理论和实践意义。目前有关人i PSC（hi PSC）氧化应激的研究相对较少,Nrf2/HO-1信号通路在其中的作用尚不明了。因此,本试验旨在用不同浓度的H₂O₂建立hi PSC氧化应激模型,检测hi PSC的抗氧化能力,并探讨Nrf2/HO-1信号通路在hi PSC氧化应激反应中的作用,为防治干细胞的氧化应激损伤提供依据。方法:本试验以不同浓度H₂O₂（0、100、200、300、400μM）处理i PSC,分别在4 h和24 h观察细胞氧化损伤的程度,通过碱性磷酸酶试剂盒（AP）和超氧化物阴离子荧光探针分别检测hi PSC多能性和ROS水平,通过免疫细胞化学、Western blotting和q RT-PCR检测（p-）Nrf2和HO-1的蛋白质和m RNA表达水平。结果:hi PSC不同浓度（0、100、200、300、400μM）H₂O₂分别处理4 h、24 h后形态出现不同程度的改变,100μM时hi PSC形态出现轻微的变化,在300μM和400μM时,hi PSC出现了明显的凋亡和损伤。AP和ROS水平分别呈H₂O₂剂量依赖性下降和升高。免疫细胞化学、Western blotting和q RT-PCR结果表明,H₂O₂各处理组Nrf2、HO-1表达水平和p-Nrf2水平均有不同程度的升高趋势,且多数达到显著水平,其中,100μM H₂O₂组Nrf2 m RNA水平和p-Nrf2蛋白质水平最高,而HO-1在200μM时表达量最高,提示较低水平的ROS能刺激Nrf2的表达,激活了HO-1的表达,以及时清除多余的ROS,维持hi PSC的氧化/抗氧化平衡,而当过氧化物水平较高时,产生较高水平的ROS,导致部分细胞出现一定程度的损伤,使Nrf2水平的上调受到影响,必须通过其他机制激活更高水平的HO-1表达才有可能尽快清除过多的ROS以对抗其导致的伤害,启动子预测表明HO-1的转录还受到除Nrf2之外的许多潜在转录因子的调控。结论:本试验构建了hi PSC氧化应激模型,表明不同浓度H₂O₂能诱导hi PSC中Nrf2和HO-1的表达以对抗过多ROS的产生。Nrf2和HO-1表达并未呈现H₂O₂浓度依赖性升高,而且HO-1启动子区存在多个转录因子结合的潜在元件,表明hi PSC氧化应激调控机制还涉及到其它相关通路的交互作用,其复杂的调控网络尚需深入探讨。