大花高代组织培养与诱变的研究

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本试验利用二倍体大花高代种子为材料,建立大花高代离体快速繁殖体系,研究大花高代组织培养结合诱变的效应,筛选出优良变异的植株,丰富种质资源,提高观赏价值,为今后的花卉引种育种研究开辟了一条可尝试的新途径。试验结果如下:1、在MS(对照)、MS+ZT0.5、MS+TDZ0.5、MS+2,4-D0.5、MS+NAA0.5五种培养基中,MS+ZT0.5、MS+TDZ0.5这两种愈伤组织诱导培养基中,外植体不仅产生了愈伤组织,而且还分化出了不定芽。MS+ZT0.5中不定芽分化率高达83%,本试验中,以MS+ZT0.5为大花高代愈伤组织和不定芽诱导最适培养基,1/2MS+IBA2作为大花高代试管苗最适生根培养基。2、以0Gy、10Gy、50Gy、100Gy、150Gy和200Gy不同剂量的60Coγ射线辐射种子,研究其对大花高代组培苗生长影响的结果表明,在50-200Gy范围内,根和真叶的生长以及植株高度都不同程度地受到了抑制,且抑制程度与辐射剂量呈正相关,而10Gy则能促进根和真叶的生长。随着剂量的增高,死亡率增高,组培苗生长41d时的半致死剂量(LD50)为150Gy。各处理组培苗培养70d后,少量瓶内开花,出现花型、花色和花瓣变异。以上结果表明,60Coγ射线辐射可以提高突变频率且诱变效应明显,有利于在大花高代育种中产生色彩丰富,花型、株型美观的变异类型。3、用不同浓度的秋水仙素分别浸泡大花高代萌动种子6h、24h,随着秋水仙素浓度的提高,组培苗受到的伤害越大,死亡率越高,低浓度的长时间处理要比高浓度的短时间处理伤害更大,在组培苗的长势及丛生芽分化上,均表现出同样的效应。本试验中,秋水仙素浸泡6h的植株受害较小,且在0.4%浓度下诱导出了加倍的植株,加倍率可达42%。加倍植株在形态上表现为叶片肥厚,叶色加深,茎秆粗壮,节间较短,叶片和茎秆上多毛,生长势强;在花型和花色上表现出了花型的变异和花色的加深。采用BD FACS Calibur流式细胞仪进行倍性鉴定表明:大花高代变异植株DNA含量分布,为二倍体和四倍体的嵌合体。
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