目的:分析遗传、环境因素及其交互作用在慢性乙型肝炎(CH)及乙肝阳性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma , HCC)发生过程中的作用。探讨NF-κB1 -94位点和NF-κBIα3’UTR、-519、-826、-881位点基因多态性与慢性乙型肝炎及乙肝阳性肝细胞癌的相关性,为寻找慢性乙型肝炎及原发性癌的易感基因提供线索。方法:利用限制性片段长度多态性—聚合酶链式反应(RFLP-PCR)方法,分别检测202例乙肝阳性原发性肝癌(HCC)患者,202例慢性乙型肝炎病人(CH),404例健康对照的NF-κB1 -94位点和NF-κBIα3’UTR、-519、-826、-881位点基因多态性情况;利用多重PCR方法鉴定CH组及HCC组中HBV基因型。哈代-温伯格遗传平衡检验在Internet上进行(http://ihg.gsf.de/ihg/snps. html)。数据录入与分析采用SPSS 15.0统计软件,应用单因素χ2检验和非条件Logistic回归模型分析环境、遗传因素及其交互作用与CH及HCC之间的联系。结果:1.各多态性位点基因型在三组人群中的频率分布NF-κB1 -94位点(ATTG1/ATTG1、ATTG1/ATTG2、ATTG2/ATTG2)基因型在健康对照组中的频率依次为30.7%、45.3%、24.0%,在CH组中的频率依次为26.7%、45.0%、28.2%,在HCC组中的频率依次为17.3%、41.6%、41.1%;NF-κBIα3’UTR位点AA、AG、GG基因型在健康对照组的频率依次为34.2%、45.8%、20.0%,在CH组中的频率依次为38.6%、29.2%、32.2%,在HCC组中的频率依次为34.7%、33.2%、32.2%;NF-κBIα-519位点CC、CT、TT基因型在健康对照组中的频率依次为79.5%、18.3%、2.2%,在CH组中的频率依次为79.7%、17.3%、3.0%,在HCC组中的频率依次为80.2%、15.3%、4.5%;NF-κBIα-826位点CC、CT、TT基因型在健康对照组中的频率依次为72.0%、26.0%、2.0%,在CH组中的频率依次为78.2%、18.8%、3.0%,在HCC组中的频率依次为73.8%、25.7%、0.5%;NF-κBIα-881位点AA、AG基因型在健康对照组中的频率依次为81.9%、18.1%,在CH组中的频率依次为93.1%、6.9%,在HCC组中的频率依次为81.2%、18.8%,在本次实验中没有发现突变型纯合子GG基因型;2.各位点基因多态性与乙型肝炎易感性之间的关系:NF-κB1 -94位点以野生型ATTG1/ATTG1为对照,CH组与健康对照组相比ATTG1/ATTG2、ATTG2/ATTG2基因型频率分布没有统计学差异(P>0.05),它们的OR值和95%CI分别为1.169(0.777-1.759)、1.367(0.863-2.165);NF-κBIα3’UTR位点以野生型AA为对照,CH组与健康对照组相比,AG、GG基因型频率分布的P值分别为0.007、0.117 ,它们的OR值和95%CI分别为0.572(0.381-0.857)、1.414(0.917-2.181);NF-κBIα-519位点以野生型CC为对照,CH组与健康对照组相比,CT、TT基因型频率分布的P值分别为0.681、0.664,它们的OR值和95%CI分别为0.910(0.582-1.424)、1.264(0.439-3.640);NF-κBIα-826位点以野生型CC为照组,CH组与健康对照组相比,CT、TT基因型频率分布的P值分别为0.049、0.618,它们的OR值和95%CI分别为0.655(0.429-0.999)、1.317(0.447-3.881);NF-κBIα-881位点以野生型AA为参照,AG基因型在健康对照组与肝炎组中的分布有统计学差异,P值为0.000,OR值和95%CI分别为0.331(0.181-0.604);3.各位点基因多态性与肝癌易感性之间的关系:NF-κB1 -94位点以野生型ATTG1/ATTG1为对照,HCC组与CH组相比ATTG1/ATTG2、ATTG2/ATTG2频率分布的P值分别为0.244、0.006,它们的OR值和95%CI分别为1.365(0.808-2.304)、2.170(1.256-3.749);NF-κBIα3’UTR位点以野生型AA为对照,HCC组与CH组相比,AG、GG基因型频率分布的P值分别为0.270、0.586,它们的OR值和95%CI分别为1.311(0.810-2.119)、1.142(0.708-1.840);NF-κBIα-519位点以野生型CC为对照,HCC组与CH组相比,CT、TT基因型频率分布的P值分别为0.671、0.495,它们的OR值和95%CI分别为0.891(0.522-1.520)、1.452(0.498-4.233);NF-κBIα-826位点以野生型CC为对照,HCC组与CH组相比,CT、TT基因型频率分布的P值分别为0.069、0.129,它们的OR值和95%CI分别为1.568(0.966-2.547)、0.191(0.023-1.619);NF-κBIα-881位点以野生型AA为参照,AG基因型在CH组与HCC组中的分布有统计学差异,P值为0.000,OR值和95%CI分别为3.288(1.708-6.330);HCC组中HBV C基因型的比例显著高于CH组,差异具有统计学意义,OR值和95%CI分别为3.881(1.902-7.921);4.基因-环境交互作用分析结果以健康组为对照,分析基因-环境交互作用在慢性乙型肝炎发生中的作用表明:NF-κB1 -94位点ATTG1/ATTG2、ATTG2/ATTG2基因型与吸烟的交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=2.395, 95%CI=1.352-4.240)、(OReg=2.623, 95%CI=1.368-5.028);NF-κBIα3’UTR位点GG基因型与吸烟之间的交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=2.908, 95%CI =1.502-5.630);以CH组为对照,HCC组为病例组分析基因-环境交互作用在HCC发生中的作用表明:NF-κB1 -94位点ATTG2/ATTG2基因型与饮酒的交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=4.410, 95%CI=2.004-9.075);NF-κBIα3’UTR位点AG、GG基因型与饮酒的交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=2.280, 95%CI=1.113-4.672)、(OReg=2.804, 95%CI=1.387-5.668);NF-κBIα-826位点CT基因型与饮酒之间的交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=2.763, 95%CI=1.401-5.448); NF-κBIα-881AG基因型与饮酒之间存在交互作用,交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=4.521, 95%CI=1.936-10.577);NF-κB1 ATTG2/ATTG2基因型与HBV C基因型之间存在交互作用,交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=5.172, 95%CI=1.301-20.560);NF-κBIα3’UTR位点AG、GG基因型与HBV C基因型之间存在交互作用,交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=7.595, 95%CI=2.090-27.605) , (OReg=6.774, 95%CI=1.871-24.528);NF-κBIα-519 CT、TT基因型与HBVC基因型之间交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=3.114, 95%CI=1.265-7.667)、(OReg=8.557, 95%CI=1.918-38.168);NF-κBIα-826 CT基因型与HBVC基因型之间交互作用的OR值和95%CI分别为(OReg=5.453, 95%CI=2.263-13.140);NF-κBIα-881AG基因型与HBVC基因型之间交互作用的OReg值和95%CI分别为(OReg=13.011, 95%CI=4.642-36.467);5.基因-基因交互作用分析结果:⑴以健康组为对照,CH组为病例组研究基因多态性与乙型肝炎易感性之间的关系。研究发现:①以同时携带NF-κB1 -94位点ATTG1/ATTG1、NF-κBIα3’UTR位点AA基因型者作为参考,ATTG1/ATTG1与NF-κBIα3’UTR位点AG基因型之间交互作用的P值为0.002,OR值和95%CI分别为(OR=0.257, 95%CI=0.110-0.599);②以同时携带NF-κB1-94位点ATTG1/ATTG1、NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κB1野生型ATTG1/ATTG1及NF-κBIα-881 AG基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布有统计学差异( P<0.05 ) , OR值和95%CI分别为(OR=0.230, 95%CI=0.066-0.802),同时携带NF-κB1杂合子ATTG1/ATTG2及NF-κBIα-881 AG基因型者在肝炎组中与健康对照组中的分布有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=0.285, 95%CI=0.105-0.775) ;③以同时携带NF-κBIα3’UTR位点AA及NF-κBIα-519位点CC基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα3’UTR位点AG及NF-κBIα-519位点CC基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=0.498,95%CI=0.312-0.794);④以同时携带NF-κBIα3’UTR位点AA及NF-κBIα-826位点CC基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα3’UTR位点AG及NF-κBIα-826位点CC或CT基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=0.609, 95%CI=0.386-0.961)、(OR=0.365, 95%CI =0.190-0.701);⑤以同时携带NF-κBIα3’UTR位点AA及NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα3’UTR位点AG及NF-κBIα-881位点AA或AG基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=0.631, 95%CI=0.411-0.968)、(OR=0.282, 95%CI=0.120-0.660),同时携带NF-κBIα3’UTR位点GG及NF-κBIα-881位点AA或AG基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=1.717, 95%CI =1.083-2.723)、(OR=0.326, 95%CI =0.107-0.988) ;⑥以同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-826位点CC基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-826位点CT基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=0.582, 95%CI=0.361-0.937);⑥以同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-881位点AG基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=0.307, 95%CI=0.157-0.604);⑦以同时携带NF-κBIα-826位点CC及NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα-826位点CC或CT基因型及NF-κBIα-881位点AG基因型者在肝炎组与健康对照组中的分布有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=0.189, 95%CI=0.043-0.822)、(OR=0.369, 95%CI=0.186-0.733);⑵以CH组为对照,HCC组为病例组研究基因多态性与HCC易感性之间的关系。①以同时携带NF-κB1野生型ATTG1/ATTG1、NF-κBIα3’UTR AA基因型者作为参考,同时携带NF-κB1突变型ATTG2/ATTG2及NF-κBIα3’UTR位点AA、AG或GG基因型者在肝炎组与原发性肝癌组中的分布均有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=2.770, 95%CI=1.086-7.065)、(OR=3.019, 95%CI=1.217-7.448)、(OR=3.019, 95%CI=1.228-7.422);②以同时携带NF-κB1野生型ATTG1/ATTG1、NF-κBIα-519 CC基因型者作为参考,同时携带NF-κB1突变型ATTG2/ATTG2及NF-κBIα-519位点CC基因型者在肝炎组与原发性肝癌组中的分布均有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=2.300, 95%CI=1.266-4.180);③以同时携带NF-κB1-94位点ATTG1/ATTG1、NF-κBIα-826 CC基因型者作为参考,同时携带NF-κB1突变型ATTG2/ATTG2及NF-κBIα-826位点CT基因型者在肝炎组与原发性肝癌组中的分布均有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=2.904, 95%CI=1.246-6.767);④以同时携带NF-κB1-94位点ATTG1/ATTG1、NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κB1野生型ATTG1/ATTG1或杂合子ATTG1/ATTG2及NF-κBIα-881位点AG基因型者在肝炎组与原发性肝癌组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=5.976, 95%CI=1.435-24.886),(OR=4.394, 95%CI=1.380-13.992),同时携带NF-κB1突变型ATTG2/ATTG2及NF-κBIα-881位点AA或AG基因型者在肝炎组与原发性肝癌组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),它们的OR值和95%CI分别为(OR=2.348, 95%CI=1.290-4.273)、(OR=5.790, 95%CI=2.040-16.431);⑤以同时携带NF-κBIα3’UTR位点AA及NF-κBIα-519位点CC基因型者作为参考,这两个多态性位点之间没有交互作用;⑥以同时携带NF-κBIα3’UTR位点AA及NF-κBIα-826位点CC基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα3’UTR位点AG及NF-κBIα-826位点CT基因型者在肝炎组与肝癌组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=2.510, 95%CI=1.170-5.386);⑦以同时携带NF-κBIα3’UTR位点AA及NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα3’UTR位点GG及NF-κBIα-881位点AG基因型者在肝炎组与肝癌组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=4.884, 95%CI=1.543-15.460);⑧以同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-826位点CC基因型者作为参考,这两个多态性位点之间没有交互作用;⑨以同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα-519位点CC及NF-κBIα-881位点AG基因型者在肝炎组与肝癌组中的分布均具有统计学差异( P<0.05 ) , OR值和95%CI分别为(OR=3.270, 95%CI=1.564-6.836);⑩以同时携带NF-κBIα-826位点CC及NF-κBIα-881位点AA基因型者作为参考,同时携带NF-κBIα-826位点CT及NF-κBIα-881位点AG基因型者在肝炎组与肝癌组中的分布均具有统计学差异(P<0.05),OR值和95%CI分别为(OR=3.748, 95%CI=1.821-7.712)。6.多因素分析结果显示, HBV C基因型、NF-κB1 ATTG2/ATTG2、和NF-κBIα-881AG基因型与肝癌的易感性有关,它们的OR值和95%CI分别为(OR=3.872, 95%CI=1.856-8.079)、(OR=2.195, 95%CI=1.215-3.965)、(OR=3.188, 95%CI=1.537-6.611)。结论:1. NF-κBIα3’UTR位点AG、NF-κBIα-826位点CT、NF-κBIα-881位点AG基因型可能是慢性乙型肝炎的保护性因素;NF-κB1及NF-κBIα-519位点多态性与慢性乙型肝炎无关;2. NF-κB1 -94位点ATTG2/ATTG2基因型是原发性肝癌的危险因素,慢性乙型肝炎患者携带NF-κB1 ATTG2/ATTG2基因型发展为肝癌的危险性增大;3. NF-κBIα-881位点多态性与原发性肝癌的易感性有关,慢性乙型肝炎患者携带杂合子AG基因型患肝癌的危险性增大;4. NF-κBIα3’UTR、-519、-826位点多态性与原发性肝癌易感性无关;5.慢性乙型肝炎患者如果感染HBV C基因型患肝癌的危险性增大;6. NF-κB1 -94及NF-κBIα3’UTR、-519、-826、-881位点基因多态性与环境危险因素、HBV基因型在肝炎及原发性肝癌发生中存在一定的交互作用;7. NF-κB1 -94及NF-κBIα3’UTR、-519、-826、-881多态性位点之间存在基因-基因交互作用。