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目的建立六味地黄汤水提醇溶部位的高效液相分离方法,并测定其中四种苷类成分的含量；观察六味地黄汤水提醇溶部位对2型糖尿病模型大鼠肝脏磷脂酰肌醇3磷酸激酶／蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号通路中胰岛素受体底物2(IRS2)、磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)、蛋白激酶B(Akt)信号因子表达的影响,从基因和蛋白水平探讨六味地黄汤水提醇溶部位干预2型糖尿病的机制,从而阐明该方干预2型糖尿病胰岛素抵抗(IR)的药效物质基础及作用机制。方法采用RP-HPLC法对六味地黄汤水提醇溶部位进行分离并测定其中四种苷类成分莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷的含量。选用Hypersile C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(27：73)为流动相；检测波长为236nm；流速为1.0ml/min；柱温为25℃。采用高糖、高脂饲料喂养4周后,再行腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)且空腹血糖(FBG)≥16.7mmol/L的大鼠建立2型糖尿病动物模型,将其随机分为空白组、模型组、罗格列酮组和六味地黄汤水提醇溶部位组,模型组和空白组给予等量蒸馏水,给药30d后,测各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)：取各组模型大鼠新鲜肝组织,采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)法测定各组大鼠肝脏组织IRS2、PI3K(p110)、AktmRNA的表达情况；免疫蛋白印迹法(WesternBlot)测定各组大鼠肝脏中IRS2、PI3K(p85)、Akt总蛋白及磷酸化蛋白的表达情况。结果1、莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷浓度分别在0.24μg～2.40μg(r=0.9996),0.24μg～2.40μg (r=0.9991),0.14μg～1.38μg (r=0.9991),0.24μg～2.40u g(r=0.9994),范围内线性关系良好。平均回收率分别为100.22%,100.83%,102.40%,101.42%, RSD分别为1.80%,1.92%,1.44%,1.50%。六味地黄汤水提醇溶部位中莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷的平均含量以醇溶部分量计算分别为1.028%,0.137%,0.258%,0.652%；按生药量计算分别为0.208%,0.028%,0.059%,0.132%。2、与模型组比较,六味地黄汤水提醇溶部位组大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平明显下降(P＜0.05)。3、与模型组比较,六味地黄汤水提醇溶部位组肝脏IRS2、P13Kp110、Akt mRNA的表达量明显上升。(P<0.05)4、与模型组比较,六味地黄汤水提醇溶部位组肝组织中IRS2、P13Kp85、Akt总蛋白及磷酸化蛋白表达均增加。(P<0.05)结论高效液相色谱法测定六味地黄汤水提醇溶部位中莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷含量的方法,稳定性和重复性较好。可用于六味地黄汤水提醇溶部位中苷类成分的质量控制。六味地黄汤水提醇溶部位有降血糖、改善IR的作用,其作用机制可能是通过上调T2DM胰岛素抵抗大鼠肝脏组织P13K、Akt信号通路中关键基因IRS2、PI3K (p110, p85)、 Akt的表达,促进肝脏组织胰岛素信号传递的恢复,干预IR,从而改善T2DM。其可能是六味地黄方改善IR,调节P13K、Akt信号通路信号转导的药效物质基础之一。该部位中的4苷类成分莫诺苷、獐牙菜苷、芍药苷和马钱苷可能为六味地黄方干预IR、调节P13K、Akt信号通路的主要药效成分之一。