【摘 要】
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目的:寻找在结直肠癌中表达异常且相对稳定的miRNA,并结合生物信息学手段预测其与结直肠癌发病相关的靶基因,初步验证miRNA对其靶基因的调控作用。为结直肠癌的早期诊断及治疗
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目的:寻找在结直肠癌中表达异常且相对稳定的miRNA,并结合生物信息学手段预测其与结直肠癌发病相关的靶基因,初步验证miRNA对其靶基因的调控作用。为结直肠癌的早期诊断及治疗提供新的策略和思路。方法:1.通过查阅文献寻找与结直肠癌发病密切相关的miRNA,运用实时定量PCR方法检测其在结直肠癌组织及正常肠粘膜对照中的表达情况。将结直肠癌中表达异常且较稳定的miRNA作为本实验的研究对象。2.运用生物信息学的方法对所选miRNA的靶基因进行预测。3.运用免疫组化的方法在样本中检测靶基因蛋白的表达情况,结合靶基因在结直肠癌发病中的作用,提出miRNA参与结直肠癌发病过程可能的机制。结果:1.通过文献检索,我们发现一些在结直肠癌中表达明显升高的miRNA,如miR-181簇和miR-183。2.通过实时定量PCR技术我们验证了miR-183在临床结直肠癌组织样本中表达相对稳定,相对于正常肠粘膜组织其表达明显升高(P<0.05),并且与结直肠癌的淋巴结转移有关。3.miR-181簇miRNA在结直肠癌组织和正常肠粘膜中表达差异不明显。4.通过Targetscan和PicTar软件预测,在结直肠癌中miR-183的作用靶标可能为抑癌基因PDCD4。5.免疫组化结果显示,在结直肠癌组织样本中PDCD4的表达相对于正常肠粘膜组织明显下降(P<0.05)。结论:miR-183在结直肠癌中表达显著升高,并且与淋巴结转移有关。PDCD4在结直肠癌组织中表达明显减弱,miR-183可能通过负调控抑癌基因PDCD4的表达,在结直肠癌的发生发展中发挥了重要作用。
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