【摘 要】
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目的:本实验属于六味地黄丸血清药物化学研究系列,在以往研究的基础上,最终要阐明六味地黄丸的主要药效物质基础、作用机理及体内变化规律。 方法:以六味地黄丸血清色谱指纹图
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目的:本实验属于六味地黄丸血清药物化学研究系列,在以往研究的基础上,最终要阐明六味地黄丸的主要药效物质基础、作用机理及体内变化规律。
方法:以六味地黄丸血清色谱指纹图为指导,采用传统与现代制备色谱技术相结合的方法,分析、分离并鉴定六味地黄丸的血中移行成分;以氢化可的松大鼠肾阴虚动物模型评价六味地黄丸的血中移行成分的补肾作用;采用Wistar乳鼠颅盖骨成骨细胞原代培养的方法,观察六味地黄丸的血中移行成分促成骨细胞的增殖作用;最后采用中药药动学的方法,研究六味地黄丸主要药效物质基础的体内动态过程。
结果:1在以往研究已经确定了六味地黄丸11个血中移行成分及其生药来源的基础上,本实验精确分离并鉴定了这11个血中移行成分,1号成分是5-羟甲基-2-糠酸;2号成分是莫诺苷;3号成分是2-羟基苯乙酮-4-葡萄糖醛酸苷;4号成分是獐牙菜苷;5号成分是马钱子苷;6号成分是4-甲氧基-5-磺酸基苯乙酮-2-葡萄糖醛酸苷;7号成分是芍药苷;8成分号是2,4-二羟基-苯乙酮;9号成分是丹皮酚的代谢产物,性质不稳定,正在分离中;10号成分是山茱萸所含成分,血中转移量小,不是六味地黄丸的主要血中移行成分,正在分离中;11号成分是丹皮酚。
2六味地黄丸的主要血中移行成分5-羟甲基-2-糠酸、混合部位(主要由莫诺苷、獐牙菜苷和马钱子苷组成)以及丹皮酚可以使氢化可的松大鼠肾阴虚模型动物的体重、心率、胸腺和脾脏重量指数、血清SOD和GSH-PX活力、血浆粘度、血清FT4、血清T、血清E2/T值、血清ALP等11项指标回调,表现出明显的补肾作用,初步确定5-羟甲基-2-糠酸、莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷和丹皮酚是六味地黄丸的补肾作用物质基础。
3六味地黄丸的主要血中移行成分的混合部位(主要由莫诺苷、獐牙菜苷和马钱子苷组成)明显表现出对体外培养大鼠成骨细胞的促增殖作用,其中5×10-5g·mL-1剂量组作用最强,初步确定莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷是六味地黄丸治疗骨质疏松的药效物质基础。
4阐明了六味地黄丸灌胃给药后大鼠体内5-羟甲基-2-糠酸、马钱子苷、2,4-二羟基-苯乙酮、丹皮酚的药动学参数,四个成分均表现出了吸收快、分布快、消除缓慢、AUC大的特点,基本反映出六味地黄丸的体内动态过程。
结论:本实验分离并鉴定了六味地黄丸的血中移成分,初步确定了六味地黄丸补肾及治疗骨质疏松的主要药效物质基础,并阐明了其体内变化规律,为六味地黄丸的现代化新药开发奠定基础。
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