雄性大鼠Inhibin α亚基的表达及其启动子表达载体的构建

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目的:确定雄性大鼠Inhibinα亚基的mRNA及蛋白在各种组织中有无表达及相对表达量。方法:选用成年SD雄性大鼠,10%水合氯醛麻醉后处死,立即取睾丸、附睾、肾、肾上腺及肝组织,采用免疫组化法和荧光定量PCR方法分别检测Inhibinα蛋白和mRNA在大鼠各组织中的表达情况。结果:Inhibinα蛋白在睾丸、附睾、肾、肾上腺组织中均有表达,在肝脏组织中无表达。InhibinαmRNA在各组织中的表达相对量依次为:肾>肾上腺>睾丸>附睾。结论:本实验从定性和定量两方面检测了Inhibinα亚基的表达情况,结果提示Inhibinα亚基不仅仅在生殖系统有表达,在其它系统也有表达。目的:将大鼠Inhibinα基因的启动子区分段克隆后分别构建真核表达载体,为进一步筛选出其核心启动子做好准备。方法:利用已有文献及网络资源进行Inhibinα启动子区的预测及生物信息学分析,用基因重组技术将预测的启动子区分段克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,并对其测序验证。结果:成功克隆了大鼠Inhibinα基因的启动子区的395bp、606bp、775bp大小的片段,并分别构建了这三种片段的真核表达载体。结论:对预测的大鼠Inhibinα基因的启动子区分段克隆,并成功构建了含有这些克隆片段的真核表达载体。
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