目的 在中医理论指导下,探讨心与衰老的密切关系,并通过实验研究进一步明确其相关性的机制,以便为从心延缓衰老提供理论和实验依据。本文分为理论探讨和实验研究两大部分。 理论探讨 历代文献的研究表明,心与健康长寿有着十分密切的关系。心为“生之本”,是说心是人体生命活动的主宰和根本。心功能的盛衰,直接影响着人体生命的寿夭,与健康长寿的关系十分密切,正如《素问·灵兰秘典论》所说:“心者,君主之官,……故主明则下安,以此养生则寿。” (一) 心与健康长寿的生理关系: 1.心主血脉的功能与人的健康长寿关系非常密切; 2.心主神志与人体生命活动密切相关。 (二) 心对人体衰老的病理影响: 1.心气亏虚致衰; 2.心血亏虚致衰; 3.心血瘀阻致衰; 4.心神失养致衰; 因此,探讨心与衰老的关系及机制对于养生具有十分重要的意义。 实验研究 方法: 1.分组 将昆明小鼠50只,随机分为正常组、模型组、维生素E-C组、补心汤治疗小剂量组、补心汤治疗大剂量组,每组10只。 2.造模 模型组、西药组、治疗大剂量、小剂量组小鼠,每日颈背部皮下注射12.5%D-半乳糖0.16ml/20g/d,连续4周,来制作衰老的动物模型。 3.给药 造模完成后,第29天开始治疗大剂量组每日灌胃补心汤0.6ml、治疗小剂量组每日灌胃补心汤0.3ml,西药组每日灌胃维生素E-C悬液2g/kg,连续4周。 检测指标 1.标本采集 第56天末次给药前禁食12h,取胸部脱毛后,剪开胸部正中皮肤和胸腔,取心尖组织0.5g左右,经预冷生理盐水漂洗,滤纸拭干,称重,量筒量取该组织块9倍重量预冷生理盐水,取2/3量倒入装有组织块烧杯中,眼科小剪剪碎组织块后倒入匀浆管中,用剩余1/3生理盐水冲洗烧杯壁,用高速组织匀翻尤碑拼吹,笋溃护麟舌学应.居戈浆机制成10%组织匀浆(在冰水中进行),然后反复冻融3次,使细胞完全破碎,细胞内容物完全游离在液相中。心组织超微结构的观察,取左心尖部组织Ilnln3大小心组织,迅速放入3%戊二醛,4℃中保存,制作组织切片进行组织形态学观察。2.指标检测①SOD检测SOD的含量以黄喋吟氧化酶法测定。②MDA检测MDA的含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法.③心组织中IL一2含量的检测采用非平衡放射免疫分析测定组织中IL一2浓度。④心组织细胞中Bcl一2的检测采用SDS一酚一氯仿法。⑤心组织超微结构的观察H一600透射电镜旧本日立公司)观察并摄影,分析。结果: 1.辛卜自汤对衰老小鼠心组织自由基的影响: 补心汤能有效减少衰老小鼠心组织的MDA含量,提高SOD活性。模型组心组织中MDA含量显著增高,与空白组比较有非常显著性差(P<0 .01)。经治疗后,补心汤治疗各剂量组及西药组血清中MDA含量均显著降低,与模型组比较有非常显著性差异(P<0 .01、P<0 .05),而补心汤治疗大小剂量组与西药组比较无显著性差异(P>0.05)。模型组心中SOD含量显著降低,与正常组比较有非常显著性差异(P<0.01)。经治疗后,补心汤各剂量组及西药组心组织中SOD含量均显著升高,与模型组比较有非常显著性差异(p<0 .01、p<0 .05),而补心汤各剂量组与西药组心中SOD含量比较无显著性差异(p>0.05)。实验结果表明,各剂量补心汤可不同程度地降低模型小鼠心组织中MDA的含量,提高SOD含量。 2.补心汤对衰老小鼠心组织超微结构的影响: 模型组小鼠的心组织损伤严重,肌原纤维排列紊乱,线粒体肿胀,峭排列紊乱,并列出现脂褐素,与正常对照组之间差异显著,和机体细胞的衰老变化相吻合。应用补心汤小鼠上述损伤明显减轻,心细胞形态结构基本正常与阳性对照组效果一致,且减轻衰老所致心细胞损伤的功效比维生素E一C组稍强。本研究结果提示补心汤可减轻半乳糖所致心损伤而造成的结构改变,对衰老小鼠心组织超微结构的病理改变有所改善,具有延缓心衰老的作用。 3.补心汤对衰老小鼠心组织IL一2的影响: 模型组心中IL一2含量显著降低,与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。经治疗后,补心汤各剂量组及西药组心中IL一2含量均显著升高,与模型组比较有非常显著性差异(p<0.01、p<0 .05),而补心汤治疗大剂量组与西药组心组织中IL一2含量比较无显著性差异(p>0.05)。实验结果表明,各剂量补心汤均可不澎君功茵学脱溥全学应.沦戈-同程度地升高模型小鼠心组织中工L一2的含量,具有增强免疫的功能。 4.辛卜自汤对衰老小鼠心组织BCL一2基因表达的影响: 补心汤可以增高衰老模型小鼠心组织中bcL一2的表达。本实验结果还显示,模型组心组织中bcL一含量显著降低,与正常组比较有显著性差异(P<0 .01)。经治疗后,补心汤各剂量组及西药组心中bCL一2含量均显著升高,与模型组比较(除心的治疗小剂量组以外)有显著性差异(p<0.01、p<0.05),而补心汤各剂量组与西药组心中bcL一2含量比较无显著性差异(P>0,05)。实验结果表明,补心汤可不同程度地升高模型小鼠心组织中bCL一2的表达量。补心汤能够调节衰老小鼠心组织BCL一2基因的表达,抑制细胞凋亡。结论: 模型组小鼠的心组织中有SOD含量降低、MDA含量增加等表现,说明我们已经成功地复制了衰老的动物模型。衰老是自然规律,自由基的损伤?