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胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,胃癌的发生、发展是多因素、多步骤和多基因改变的复杂过程,其发病机制尚未完全阐明。本研究为了探讨基因表达谱芯片和组织芯片技术在高通量筛查肿瘤相关基因群及研究胃癌分子病理学变化中的应用价值,通过研究人胃癌组织和癌旁正常组织中差异表达的基因,寻找出与胃癌发生的相关基因,在基因水平上确定胃癌相关标志物;通过原位观察胃癌及其癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖的表达,及对部分凋亡调控基因和蛋白酶的表达分析,探讨凋亡相关调控基因和凋亡关键效应酶在胃癌恶性转化进程中的作用,为胃癌的进一步研究、诊断、治疗提供理论及实验依据。 本实验将包含4096条人cDNA用点样仪在特制玻片上制备成表达谱芯片,按一步法抽提胃腺癌和对照组正常胃粘膜组织的总RNA,通过逆转录方法将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织cDNA上,制成探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描芯片荧光信号图像,通过计算机数据处理分析两种组织之间差异表达的基因;应用组织芯片技术,通过免疫组织化学方法分别检测21例胃癌、19例癌旁组织和21例正常胃粘膜标本中Cathepsin D和CD9表达情况,对基因芯片检测结果进行部分验证;利用DNA末端标记技术(TdT—mediated dUTP—blotin nick end labeling,TUNEL法)和增殖细胞核抗原免疫组织化学技术原位观察了46例胃癌、20例癌前病变、24例正常粘膜中的凋亡细胞和增殖细胞;通过免疫组织化学法原位观察了凋亡相关基因P53、bcl—2、c—myc蛋白的阳性表达率,探讨与细胞凋亡的关系;利用组织芯片通过免疫组织化学技术S—P法对凋亡关键效应酶Caspase—3、Caspase—8在胃癌、癌旁和正常胃粘膜中的表达进行了检测。