论文部分内容阅读
目的研究原花青素B2（PCB2）对过氧化氢（H2O2）或高糖（HG）诱导的H9C2心肌细胞氧化损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法H2O2损伤保护实验分组为:正常对照组、H2O2损伤组、PCB2保护组H2O2+PCB2（5μmol/L）、H2O2+PCB2（15μmol/L）、H2O2+PCB2（45μmol/L）。高糖损伤保护实验分组为:正常对照组、HG损伤组、PCB2保护组HG+PCB2（5μmol/L）、HG+PCB2（15μmol/L）、HG+PCB2（45μmol/L）。采用MTT法检测H9C2心肌细胞的活力;采用蛋白印迹法检测心肌细胞中NOD样受体蛋白-3（NLRP3）、半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）、白细胞介素（IL）-1β和IL-18蛋白的表达水平;采用荧光染料二氢乙啶（DHE）染色法检测心肌细胞内活性氧（ROS）的水平;检测心肌细胞或培养基中乳酸脱氢酶（LDH）的活性、丙二醛（MDA）的含量、总抗氧化酶（T-AOC）的活性、超氧化物歧化酶（SOD）的活性、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性水平。结果（1）与对照组相比,当H2O2作用于H9C2心肌细胞时,细胞的活力水平明显下降,乳酸脱氢酶（LDH）释放量增加,表明H2O2引起细胞损伤。与H2O2组相比,PCB2增加了细胞的活力,降低了LDH的释放量,并且PCB2的作用呈剂量依赖性,表明PCB2能够减轻由H2O2引起的H9C2心肌细胞的氧化损伤。（2）与对照组相比,H2O2组心肌细胞中NLRP3,caspase-1,IL-1β和IL-18蛋白的表达增加。与H2O2组相比,PCB2组中NLRP3,caspase-1,IL-1β和IL-18蛋白的表达减少,且PBC2的作用呈剂量依赖性的方式。（3）与对照组相比,H2O2组心肌细胞内MDA和ROS的产生增加。与H2O2相比,PCB2的处理减少了MDA和ROS的产生,并呈剂量依赖性。（4）H2O2组的T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px的活性均低于对照组。然而,与H2O2组相比,PCB2的处理以剂量依赖性的方式增加了T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px的活性。（5）与对照组相比,HG组心肌细胞的活力水平下降,乳酸脱氢酶（LDH）释放量增加,引起了细胞损伤。与HG组相比,PCB2组细胞的活力增加,LDH的释放量减少,并且PBC2的作用呈浓度依赖性,表明PCB2能够减轻由HG引起的H9C2心肌细胞的损伤。（6）与对照组相比,HG增加了心肌细胞内MDA和ROS的水平。与HG组相比,PCB2组细胞内的MDA和ROS产生减少。（7）与对照组相比,HG组内的T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px的活性降低。与HG组相比,PCB2组T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px的活性增加。结论原花青素B2对H2O2和高糖诱导的H9C2心肌细胞的氧化应激损伤具有保护作用,其机制与抑制NLRP3炎症体的激活有关。