细菌视紫红质折叠机理的研究

来源 :中国石油大学(华东) | 被引量 : 0次 | 上传用户:coffeedoly
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蛋白质是生物体内重要的分子机器,膜蛋白作为整合到细胞膜或细胞器膜上的一类蛋白,是揭密生命基本过程的关键,对药物开发及相关疾病治疗等具有重要意义。细菌视紫红质是嗜盐菌紫膜上唯一的蛋白质,由于其良好的稳定性、可逆的SDS折叠/去折叠过程等而成为跨膜蛋白折叠研究的典型。本论文结合国内外研究现状,采用多种物理及化学技术对细菌视紫红质在磷脂双分子层囊泡中的折叠进行了详细的热力学及动力学表征,为单分子荧光在膜蛋白折叠中的应用奠定了重要基础。将单分子荧光技术引入膜蛋白折叠研究是本论文创新点之一,论文设计并构建了0C-249C等9个双定点突变体,通过构建pBA2/MPK409嗜盐菌表达体系得到了天然细菌视紫红质蛋白。对0C-249C的AF488/647双荧光标记发现,染料间存在明显荧光共振能量转移。DDM不会影响目的蛋白与自由染料的分离效果,为膜蛋白增溶及标记后纯化提供了重要借鉴。论文制备了粒径分布均一的POPC等磷脂双分子层囊泡,实现了细菌视紫红质的高效重组,保持了膜蛋白的天然结构与功能,对膜蛋白研究具有重要意义。细菌视紫红质在磷脂双分子层囊泡中的稳定性研究系统揭示了其热力学相关性质,为囊泡弯曲应力与膜蛋白稳定性的关系提供了直接的实验证据,细菌视紫红质稳定性随囊泡弯曲应力增大而增大。此外,细菌视紫红质在模拟生物膜中的折叠动力学数据也为其折叠模型的建立提供了重要信息。不同粒径囊泡中细菌视紫红质的稳定性及折叠动力学研究表明,囊泡粒径越小,磷脂分子与目的蛋白结合越紧密,相互作用力越强,细菌视紫红质稳定性越高,折叠速率及复性效率越低。这是关于囊泡粒径与细菌视紫红质稳定性及折叠动力学的首次报道。不同温度下的去折叠动力学结果显示,在研究范围内未发现其他中间态的存在,细菌视紫红质折叠至少存在4个过程和3个中间态。本论文系统揭示了细菌视紫红质在模拟生物膜中的热力学及折叠动力学信息,为单分子荧光研究奠定了重要基础,对其他膜蛋白折叠的研究具有重要借鉴意义。
其他文献
目的 分析玻璃体注射雷珠单抗治疗湿性老年黄斑变性的疗效。方法 选取我院2015年1月~2016年1月收治的湿性老年黄斑变性患者38例,采用随机分组的方式分为对照组和观察组,各19例。
随着人们生活水平的提高,人们对广告的诉求点也在不断提高,广告电影化便在这样的环境下应运而生,它是广告与电影的完美结合。电影的手法丰富了广告的表现形式,它为广告提供了
在20世纪海外的中国文学研究中,唐代文学是最受关注的领域之一。集中了许多优秀学者,出版了许多有价值的学术著作,台港澳地区的唐代文学研究,选题广泛,新颖和研究方法多样化,但研究
目的 分析中小学生预防性病、艾滋病健康教育的效果。方法 选取我市6000名中小学生作为研究对象,对实施预防性病、艾滋病健康教育的效果进行分析,主要调查艾滋病相关知识、态
电子商务时代的到来,开淘宝店已经不是新鲜的事情了,特别是对于上班族来说,业余时间开个淘宝店,作为第二职业,是个不错的选择。北京的卢女士就开了一家淘宝店,刚开一个月,这就跟快递
二维过渡金属硫化物MX2(其中M=Mo,Mn,Ni,Sn,Fe,Sb;X=S)由于其类石墨烯结构,近年来在钠离子电池(sodium ion batteries,SIBs)领域中吸引了很多研究者的目光。在不同种类的过渡金属硫化物中,层状二硫化钼(MoS2)被认为是一种极具前景的钠电负极材料,主要是由于其有较高的理论容量(670 mAh g-1),较低的成本和污染较小对环境友好等优点。类石墨烯MoS2
目的:本研究主要通过三维彩色多普勒能量超声评估子宫内膜容受性,比较妊娠组和未妊娠组之间的差异,从而进一步明确三维能量多普勒超声在评估子宫内膜容受性方面的价值,其测量参数主要包括子宫内膜厚度、内膜类型、宫腔容积、内膜及内膜下血流等。同时探讨冻融胚胎移植(Frozen-thawed embryo transfer,FET)后使用不同的黄体支持方案对妊娠结局的影响,以期为临床工作提供指导作用。方法:收集
NiO薄膜是一种新型的宽禁带透明半导体材料,由于其具有优良的光学、电学、磁学等特性,在电致变色器件、紫外光探测器、存储器等方面具有广泛应用,近年来吸引了国内外学者的广
<正>遍布35个国家93个油气项目的中国油气国际合作,有深度亦有广度。目前,来自"一带一路"沿线国家的原油进口量已经占到中国原油进口总量的76%,已然成为中国经济社会发展的支
近年来,钠离子电池作为极具应用潜力的能源储存转换系统而备受关注。过渡金属硫化物具有良好的氧化还原可逆性、高的理论容量、资源丰富等优点。但是其用于钠离子电池负极时普遍存在导电性差、体积膨胀变化大的缺点,这导致其实际容量偏低、循环稳定性差。针对该问题,本文采用多种制备方法将过渡金属硫化物与碳基材料复合,缓冲其体积膨胀,增强其导电性、循环稳定性,并对复合材料的结构、电化学性能进行研究。研究内容如下:1、