肺癌相关间充质干细胞促进肺癌转移的机制研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:greenboy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本课题旨在研究肺癌组织来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对肺癌细胞系生物学特征的影响,并初步探究肺癌相关MSCs促进肺癌转移的机制。  方法:无菌条件下收集新鲜切除的肺癌患者瘤组织分离肺癌相关MSCs,并进行体外培养传代及鉴定。慢病毒感染建立稳定表达绿色荧光蛋白(CopGFP)的人肺腺癌细胞株A549和H1299。体外,Brdu法检测肺癌相关MSCs对A549和H1299增殖的影响;划痕实验检测肺癌相关MSCs对A549和H1299迁移能力的影响;Transwell法检测肺癌相关MSCs对A549和H1299侵袭能力的影响。体内,检测肺癌相关MSCs有无致瘤性;A549细胞按高、中、低三种细胞数进行裸鼠皮下接种,利用小动物活体成像技术观察肺癌相关MSCs对A549生长的影响;尾静脉注射A549细胞,利用小动物活体成像技术观察肺癌相关MSCs对A549转移能力的影响。qPCR和Western blotting检测A549与肺癌相关MSCs共培养后的A549细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标表达的变化;qPCR检测A549与肺癌相关MSCs共培养后A549细胞干性指标(CD133、CD44、NANOG、SOX2、OCT4)变化;ELISA法分别检测A549和肺癌相关MSCs基质金属蛋白酶MMP2的分泌水平,qPCR检测A549与肺癌相关MSCs共培养后的MMP2变化,从而初步探究肺癌相关MSCs促进肺癌转移的机制。  结果:成功从肺癌患者瘤组织中分离并培养肺癌相关MSCs,经鉴定其具有多向分化潜能,且表面标志表达符合国际认定标准。经慢病毒感染成功建立稳定表达绿色荧光蛋白的人肺腺癌细胞株A549-CopGFP和H1299-CopGFP。体外,肺癌相关MSCs对肺癌细胞增殖无明显影响,但可明显提高肺癌细胞的迁移能力和侵袭能力。体内,肺癌相关MSCs不但能够促进肺癌细胞的生长,提高肺癌细胞在体内的成瘤率,还能促进肺癌细胞在体内转移。进一步研究发现,肺癌细胞与肿瘤相关MSCs共培养后,肺癌细胞EMT指标(转录因子Snail和Slug)在RNA和蛋白水平上明显增加,干性指标(CD133、CD44、NANOG、SOX2、OCT4)在RNA水平上明显增加。肺癌细胞表达MMP2较低,但肺癌相关MSCs高表达MMP2;肿瘤相关MSCs能够促进MMP2RNA水平的表达。  结论:本课题成功分离并鉴定了肺癌组织来源的肺癌相关MSCs,首次通过体内外实验明确肺癌相关MSCs能够促进肺癌细胞的转移,这一作用与肺癌相关MSCs促进肺癌细胞EMT转化、增强干性以及肺癌相关MSCs高分泌MMP2有关。本研究有力证明了肺癌相关MSCs与肿瘤细胞的相互作用,为深入研究间充质干细胞与肿瘤及其微环境之间的相互联系提供了理论依据。
其他文献
介绍一种探测金属锚杆位置的仪器。该仪器以单片机为核心,兼有减幅式探测深度较大和差频式分辨能力较强的双重优点。 An instrument to detect the position of a metal anch
时至今日,调控胚胎着床和发育的具体机制仍不明确。成功的着床取决于胚泡的侵入能力和子宫内膜的容受性两方面因素。子宫内膜是个非常独特的组织,它在卵巢性激素的作用下在整个
胶带运输机墙板结构的改进江西铜业公司银山铅锌矿选矿厂新碎矿系统,生产能力为2500t/d,采用三段破碎的单线生产流程,有胶带运输机10多台,运输距离达500多米。在日常生产中,胶带机的胶带跑边或
目的:探讨活化的肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associnated macrophages,TAMs)对肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵袭转移和干性特征的影响,并进一步探讨其潜在的分子机制。  
“核磁共振在测井中的应用”专题研讨会在美国陶斯举行国际职业测井分析家协会(SPWLA)于1994年10月16日~20日在美国新墨西哥州的陶斯(Ta。)召开了“核磁共振在测井中的应用”专题研讨会,与会代表88人,来
妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP,intrahepatic cholestasis of pregnancy),是妊娠中晚期特有的并发症,临床上以孕妇发生皮肤瘙痒、黄疸异常为特征。大多伴有肝功能生化指标的异常
全世界的海绵钛与矿石中的二氧化钛产量(Kt)近10年(1984~1993年)全世界生产的铁矿石与钛精矿中的TIO。(包括二氧化钛渣)量和海绵软量分别列于表l、2。生产钛矿石与钛精矿的国家有14个:中国、芬兰、挪威、
为十六大营造昂扬向上、团结奋进、开拓创新的良好氛围,是近期电视宣传的重中之重。本期特刊登中宣部副部长、国家广电总局局长徐光春,中央电视台台长赵化勇在中央电视台召开
赤城县后沟金矿是新建矿山,设计采选能力为300t川。金矿属破碎带钾质蚀变岩型金矿床。矿体厚度较大,倾角缓,品位低。上盘有较厚的破碎带覆盖,中间被夹石分割,开采难度大。曾选择多
AREVIEWOFINTEGRATEDEXPLORATIONMETHODOFOILANDGAS¥DengLong-wu;GuoQian-jie(ExplorationBureauofChinaNaionalPetroleumCorporation)T... AREVIEW OF INTEGRATED EXPLORATIONMETHODOFOILANDGAS $ DengLong-wu; GuoQian-jie (Exploration Bureau of China National Petroleum
期刊