子宫内膜炎（Endometritis）是牛生殖系统常见的疾病。导致患牛受孕率降低,影响养牛业发展。课题组研究发现致荷斯坦奶牛子宫内膜炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）。临床治疗子宫内膜炎多使用抗生素和激素,虽然疗效较好,但是有毒副作用,同时会影响食品安全。姜黄的有效成份姜黄素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降脂等作用,且毒性小、安全性高。为把姜黄素引入到应用治疗奶牛子宫内膜炎的中蒙药方剂中,进一步研发抗炎中蒙药方剂、改进配伍、提高疗效提供理论依据。本研究包括以下6个方面:试验Ⅰ为了研究姜黄素对奶牛子宫内膜炎主要致病菌的抑菌效果及机理。用牛津杯法测定了姜黄素对奶牛子宫内膜炎主要致病菌S.aureus、E.coli的抑菌直径,用二倍平板稀释法测定了最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）。在以上基础上又测定了姜黄素对主要致病菌感染小鼠的体内抗菌保护率。为了进一步探讨姜黄素对主要致病菌的抗菌机理,测定了姜黄素对主要致病菌的生长曲线、细胞壁、细胞膜渗透性和细胞膜的膜电位的影响。结果表明,姜黄素的抑菌效果和小鼠的保护率虽然不及环丙沙星,但是实验数据表明姜黄素对主要致病菌都有抑菌作用,对感染主要致病菌的小鼠也有一定的保护作用;姜黄素对这两种致病菌的生长曲线、细胞壁、细胞膜渗透性和细胞膜的膜电位均有影响。提示姜黄素可以从破坏细菌细胞壁、增加胞膜的通透性和影响细胞的生物电等不同方面起到抑菌效果。试验Ⅱ因为致病菌引起小鼠和大鼠的炎症,机体病理反应基本相同,为了操作方便下面试验动物选用了大鼠。为进一步在动物试验上研究姜黄素对子宫内膜炎的疗效和抗炎机理。用子宫内灌注主要致病菌的方法复制大鼠子宫内膜炎模型,观察造模前后大鼠一般状态、体温的变化以及全血细胞分析仪分析白细胞计数分类的变化,比较正常组与造模组子宫内容物细菌培养情况、子宫解剖形态、组织病理变化。结果:与造模前相比,造模后大鼠精神变差、出现拱背、食欲减退、阴门红肿潮湿、灌菌1d后体温开始升高。注菌3d后大鼠外周血白细胞数、中性粒细胞和单核细胞百分比显著升高（P<0.05）,造模组子宫分泌物细菌培养可见大量的致病菌存在,与正常组相比造模组子宫内膜上皮细胞变性、坏死、内膜下淤血水肿、大量的炎细胞浸润。结果表明,通过子宫内灌注致病菌可成功复制大鼠子宫内膜炎模型。试验Ⅲ为了研究姜黄素对子宫内膜炎大鼠血液流变学的影响,选用60只雌性SD大鼠随机分为6组,正常组、模型组、姜黄素高、中、低剂量组和环丙沙星组,每组10只,除正常组外,其他组造模后用药干预,用药7d后,用全自动血液流变学分析仪分析大鼠血液流变学指标的变化,用酶联吸附法（ELISA法）检测血清中血栓素B₂（TXB₂）和6-酮-前列腺素F_1α(6-Keto-PGF_1α)含量的变化,并取子宫进行形态、子宫指数和组织病理学观察。结果:子宫内膜炎大鼠血液流变学出现异常,经姜黄素治疗后,与模型组相比各治疗组大鼠全血黏度（Whole blood viscosity,WBV）、血浆黏度（Plasma viscosity,PV）、红细胞聚集指数（Erythrocytye accumulation index,EAI）及血沉（Erythrocyte sedimentation rate,ESR）均显著降低（P<0.05）;血清中6-Keto-PGF1_α含量显著升高（P<0.05）、TXB₂含量明显降低（P<0.05）;大鼠子宫病变形态均有改善,子宫指数显著下降（P<0.05）,子宫炎症病理变化都有不同程度的消退,并有剂量依赖性。结果提示:子宫内膜炎大鼠有血瘀症出现,姜黄素能够改变血液流变性,从而改善微循环,促进子宫内膜炎性病灶消退,其作用可能与姜黄素提高血清中6-Ke-to-PGF_1α的含量,降低TXB₂的含量有关。试验Ⅳ为了研究姜黄素对子宫运动及生殖激素的影响,选用30只大鼠随机分为生理盐水组、缩宫素组、姜黄素高、中、低剂量组。用BL-420E生物信号采集系统观察并记录姜黄素对大鼠离体子宫收缩强度和频率的影响。为了进一步探讨姜黄素兴奋子宫的机理,研究了姜黄素对子宫内膜炎大鼠子宫雌激素（Eestrodiol,E₂）、孕激素（Progesterone,P）水平的影响。选用60只雌性SD大鼠随机分为6组,正常组,模型组、缩宫素组、姜黄素高、中剂量组,每组10只,除正常组外,其他组造模后用药干预,用药7d后,用放射免疫方法检测姜黄素对子宫内膜炎大鼠子宫雌激素（Eestrodiol,E₂）、孕激素（Progesterone,P）水平的影响,结果:与生理盐水组相比姜黄素各组使大鼠离体子宫收缩强度和频率都显著增加（P<0.05）,与缩宫素组相比姜黄素高、中剂量组大鼠子宫收缩强度和频率均升高（P<0.05）,姜黄素低剂量组的收缩强度和缩宫素组无显著性差异,而收缩频率显著高于缩宫素组（P<0.05）;与正常组相比,模型组大鼠子宫组织中E₂水平显著降低（P<0.05）、P水平显著升高（P<0.05）。与模型组相比,姜黄素治疗组大鼠子宫组织中E₂水平显著升高（P<0.05）、P水平显著下降（P<0.05）。结果提示,姜黄素有兴奋大鼠子宫的作用,能使子宫产生阵发性收缩,不同于缩宫素的强直收缩,这样的收缩有助于促进炎性产物及时排出和加快子宫机能的恢复。子宫内炎症影响了子宫中E₂、P的水平,姜黄素不但能够升高子宫的雌激素水平,还能降子宫的孕酮水平,这可能是姜黄素治疗子宫内膜炎和兴奋子宫的机理所在。试验Ⅴ为了进一步从细胞分子水平探讨姜黄素对试验性大鼠子宫内膜炎的疗效和抗炎机理,试验动物和分组同试验Ⅲ。用免疫组化法检测子宫内膜炎大鼠子宫内CD14的表达,用ELISA法检测血清和子宫组织中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10炎症因子的变化,结果:与模型组比较,姜黄素各治疗组子宫组织中CD14的表达显著降低（P<0.05）;血液和子宫组织中TNF-α、IL-8、IL-6的含量显著降低（P<0.05）,而IL-10的含量显著升高（P<0.05）。提示姜黄素对子宫内膜炎的炎症具有控制作用,其作用机制可能通过抑制炎症细胞膜上CD14的表达,阻止了炎症介质对细胞的刺激,进一步影响了炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10,IL-8的分泌,也可能同时直接降低血液和组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10,IL-8分泌,从而控制子宫组织炎症反应的发生、发展和蔓延。试验Ⅵ为了进一步探讨姜黄素对炎症信号传导通路的影响,试验动物和分组同试验Ⅲ。用Wester-blot法检测各组大鼠子宫组织中pIκB和IκB、p65和p-p65、IKKa和TLR4表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠子宫组织中p IκB、p-p65、TLR4、IKKa的表达显著升高（P<0.05）,IκB的表达显著下降（P<0.05）;与模型组相比,黄素各治疗组大鼠子宫组织中p IκB、p-p65、IKKa、TLR4表达水平下降（P<0.05）,IκB的表达含量升高（P<0.05）,并且成剂量依赖性。提示细菌性子宫内膜炎的炎症反应和TLR4-IKKa-NF-κB炎症型号通路有关,姜黄素可从多种途径阻断TLR4-NF-κB炎症反应信号传导通路,从而抑制炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8等的大量释放,最终参与调控炎症及免疫反应。本研究从不同角度探讨了姜黄素防治子宫内膜炎的作用机理,结果显示了姜黄素对奶牛主要致病菌有很好的抑菌效果,对致病菌感染的大鼠子宫内膜炎模型有很好的治疗效果,证明了姜黄素有抑菌抗炎等药理作用,为今后姜黄素在临床上进一步开发应用治疗子宫内膜炎方面提供了科学依据。