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第一部分Thl和Th17细胞在口腔扁平苔藓病损组织中的分布及辅助性T淋巴细胞转录因子特征目的：口腔扁平苔藓(oral lichen planus, OLP)被认为是一种常见的发生于口腔粘膜的自身免疫性疾病,但具体的病因仍不清楚。目前的研究发现T淋巴细胞,尤其是辅助性T细胞(helper T lymphocytes, Th)在OLP的发病过程中发挥重要作用,为此本研究探索OLP患者局部病损组织中辅助性T细胞亚群Thl细胞和Th17细胞的可能作用。材料与方法：该实验共募集43位OLP患者和13位健康志愿者。我们采用双重免疫荧光染色技术检测OLP患者口腔粘膜病损组织中是否存在Thl细胞和Th17细胞；此外通过实时定量PCR实验检测病损组织中四种常见的CD4+T淋巴细胞亚群Th1、Th2、 Th17以及Treg细胞的特征性转录因子T-bet、GATA3、RORγτ以及FOXP3的表达情况。结果：我们发现OLP患者病损组织上皮淋巴细胞浸润层中可检测到数量明显增多的Th1细胞和Th17细胞,二者均散在分布于固有层中。通过定量分析发现转录因子T-bet、 RORγτ和FOXP3在OLP局部组织中的表达显著高于正常粘膜,而且均与OLP的临床分型密切相关。此外,我们通过对T-bet与GATA3以及RORγτ和FOXP3的比值进行分析发现OLP组织中T-bet/GATA3比值均明显高于对照组,而且萎缩糜烂型OLP组与对照组的差异具有统计学意义；同时萎缩糜烂型OLP组RORγτ/FOXP3比值显著高于网状型OLP组和健康对照组,而网状型OLP组的RORγτ/FOXP3比值虽然高于对照组,但差异未表现出显著性。结论：研究表明Th1细胞、Th17细胞和Treg细胞均参与了OLP的局部免疫反应,而且在OLP的致病过程中存在Th1细胞优势的Th1/Th2细胞失衡,此外,Th17/Treg失衡也参与了重症型OLP的致病过程,主要表现为Th17细胞优势,这些发现增加了我们对OLP致病机制的认识。第二部分口腔扁平苔藓患者外周血中Thl和Th17细胞比例升高在其发病机制中的意义目的：口腔扁平苔藓(oral lichen planus, OLP)是一种病因不明的T细胞介导的自身免疫性疾病。辅助性T细胞(helper T lymphocytes, Th)在OLP的致病过程中发挥重要作用,Th1、Th17和Treg细胞被证实在OLP的局部免疫反应过程中发挥重要的作用,为此本研究进一步探索OLP患者外周血中辅助性T细胞亚群Thl细胞和Thl7细胞的可能作用。材料与方法：该实验共募集40位OLP患者和15位健康志愿者。我们采用细胞内细胞因子染色和流式细胞术检测OLP患者外周血中Thl细胞和Th17细胞的比例；此外通过ELISA实验测定血清中干扰素-γ (interferon-gamma, IFN-γ)和白介素-17(interleukin-17, IL-17)的浓度。结果：我们发现OLP患者外周血中Th1细胞和Th17细胞的比例较正常人群显著升高,同时萎缩糜烂型OLP患者中的Th17细胞比例明显高于网状型OLP组。此外OLP患者血清IL-17水平显著高于对照组,同时萎缩糜烂型OLP患者血清中IL-17水平高于网状型；然而OLP患者血清IFN-γ却较对照组轻度降低。结论：结果表明OLP患者外周血中的Th1细胞和Th17细胞均参与了OLP的致病机制,IL-17可能是OLP病理过程中的重要促炎症细胞因子,这有助于增强我们对OLP致病机制的认识。第三部分IL-17在口腔扁平苔藓病损中的表达及其对趋化因子CCL20表达的促进作用目的：口腔扁平苔藓(oral lichen planus, OLP)是一种病因不明的发生于口腔粘膜的慢性炎症性疾病,T细胞介导的免疫紊乱被认为是其重要的致病机制。我们的研究已经证实Th17细胞参与了OLP的局部炎症反应,在本研究中,我们进一步探索Th17细胞在OLP局部病变中的作用机制及其迁徙机制。材料与方法：24例网状型OLP患者、19例萎缩糜烂型OLP患者和13位健康志愿者被募集参与本试验。我们采用免疫组织化学染色法检测IL-17受体(interleukin-17receptor, IL-17RA)在OLP病损组织中的表达；此外我们采用实时定量PCR实验检测IL-17mRNA和CCL20mRNA在OLP组织中的表达情况。结果：我们发现网状型OLP组和萎缩糜烂型OLP组口腔粘膜病损组织中IL-17基因的表达显著高于正常口腔粘膜组织(P=0.0095,P<0.0001),同时其在萎缩糜烂型OLP组组织中的表达量明显高于网状型OLP组(P=0.0012)。OLP组织标本局部组织中均存在IL-17RA的表达,IL-17RA主要表达于上皮基底角质形成细胞；同时在上皮下淋巴细胞浸润层中也可见相当数量的炎症细胞表达IL-17RA。CCL20基因在网状型OLP组和萎缩糜烂型OLP组局部组织中的表达水平显著高于对照组(P=0.0357,P<0.0001)；其在萎缩糜烂型OLP患者局部组织中的表达水平较网状型OLP组升高明显。而且OLP患者病损组织中CCL20mRNA的表达随IL-17mRNA的表达升高而增加,IL-17与病损局部的CCL20的产生呈正相关(P=0.003)。结论：Th17细胞通过产生促炎症细胞因子IL-17,并与表达于角化细胞表面的IL-17RA特异性结合,进而诱导角化细胞释放趋化因子CCL20,从而导致Th17细胞及其它的相关炎症细胞向OLP局部病损组织迁徙和浸润,这些发现增强了我们对OLP局部炎症细胞浸润机制的认识。