C6大鼠神经胶质瘤细胞中热诱导的65kD ATP结合蛋白水解酶的基因克隆

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热休克处理C6大鼠神经胶质瘤细胞,诱导细胞合成一种分子量约65kD的ATP结合蛋白水解酶.它可以降解修饰HSP68(HSP70家族的一员),而使其具有蛋白水解酶功能.分析65kD ATP结合蛋白水解酶的N-端部分氨基酸序列,并与蛋白质资料库里的其他蛋白质比较,尚未找出这种蛋白水解酶的同源物.该文以已知的65kD ATP结合蛋白水解酶N-端9个氨基酸序列为基础,设计出一组寡核苷酸作为简并引物,用锚定PCR的方法去克隆此蛋白水解酶的基因,结果得到一个热诱导的960bp cDNA片段.Blastn检索显示:该DNA片段尚未登录.根据引物特征推测,此960bp的DNA片段可能属于65kD ATP结合蛋白水解酶基因的一部分.
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