【摘 要】
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该工作的目标是探讨粘附分子αβ的拮抗活性片段PEX(基质金属蛋白酶MMP-2的C-末端片段)在细胞外分泌的情况及在体内外的基因导入体系,拮抗肿瘤的效应,开发高效、靶位于点为细
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该工作的目标是探讨粘附分子α<,v>β<,3>的拮抗活性片段PEX(基质金属蛋白酶MMP-2的C-末端片段)在细胞外分泌的情况及在体内外的基因导入体系,拮抗肿瘤的效应,开发高效、靶位于点为细胞外的抑制血管发生、拮抗肿瘤的效应,开发高效、靶位点为细胞外的基因导入体系,为未来在病人体内制造可控性药物生物反应器奠定前期基础.首先完成PEX的原核细胞表达载体构建,融合蛋白表达,纯化,抗体制备.在此基础上建立哺乳类细胞高效表达具有细胞外定位的基因导入体系并探讨该载体携带的PEX片段在细胞外分泌情况及体内外的抑制血管发生,拮抗肿瘤的效应.利用PCR及DNA重组技术制备各种表达载体,同时将重组的腺病毒包装成完整的的腺病毒;用ELISA、Western杂交、间接免疫荧光检测腺病毒感染后细胞目的的蛋白表达水平.通过鸡胚绒毛尿囊膜血管发生实验和同系鼠抑瘤实验检测所筛选片段对血管发生和肿瘤生长的影响.结果表明融合蛋白CBP/PEX具有抑制人脐静脉血管内皮细胞的生长和鸡胚绒毛尿囊膜血管发生的作用,而且由腺病毒介导的带有分泌信号肽的PEX具有抑制同系鼠移植瘤生长的作用.
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