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MAGEL2基因在人、鼠和猪中都是父源表达,为母系印记基因,在下丘脑发挥重要的调控功能。鼠中该基因异常表达,不仅出现母鼠的后代照看、生物钟调节和繁殖能力下降,而且公鼠的性行为出现嗅觉功能障碍,幼崽断奶前死亡率上升。这些研究表明MAGLE2基因和哺乳动物的繁殖性状有着重要的关系。本研究为了研究MAGEL2基因在猪中的表达与猪的母性行为的相关性,以母性差异极大的梅山猪与杜洛克猪作为研究对象,通过实时荧光定量PCR方法对下丘脑等13个组织的表达情况做了分析,并对不同时期的胎盘表达做了分析；为进一步研究MAGEL2基因表达的分子机制,本研究克隆了MAGEL2基因的启动子,对其进行了信息学分析,并构建了启动子缺失片段荧光素酶报告基因表达载体,利用细胞瞬时转染技术对该基因进行了启动子活性分析。本研究主要取得了如下结果和结论：1.本研究为分析№4GEL2基因在不同猪种以及不同组织间的表达差异,从而探讨MAGEL2基因和猪繁殖性状之间的关系,采用荧光定量PCR技术检测MAGEL2基因组织表达水平。MAGEL2基因在所有被检测初生猪组织中都有表达,在下丘脑中的表达量最高(P<0.01),而且梅山猪下丘脑中的表达量极显著高于杜洛克猪(P<0.01)。虽然MAGEL2基因在梅山猪怀孕不同时期胎盘表达量没有显著性差异(P>0.05),但是梅山猪怀孕30天胎盘中表达量极显著高于杜洛克猪(P<0.01),而且在分娩后脱落的胎盘中不表达。所以MAGEL2基因与猪母性行为和胎盘功能可能密切相关,是与猪繁殖性状相关的候选基因。2.通过5’RACE技术,克隆得到了MAGEL2基因110bp的5’UTR序列,确定了该基因的转录起始位点。根据猪基因组序列,克隆了梅山猪和杜洛克猪起始密码子前约2kb的序列,对梅山猪启动子1883bp和杜洛克猪启动子1885bp,包含110bp的5’UTR序列,进行了信息学分析。结果显示,两种猪的序列存在9处碱基差异,其中梅山猪缺失了2个碱基,这些碱基的差异可能是造成该基因在不同猪种间差异表达的原因之一。在这近2kb的范围内并不存在CpG岛,但预测得到两个得分较高的核心启动子序列,为别为TTTTCCCCCTATATATTAA CCTTGGATCTATTCATTCCTCATTTTATTAT (Atart:-1164, End:-1115, Score:0.87)和ATACCCCATTCTAAAAATGTTGCCACTTGTGGGTGTCTGGAACATCT CAA (Atart:-1002, End:-953, Score:0.97),在1885启动子序列中TATA盒共有18个,而具有典型TATA盒序列特征的共有7个,位于转录起始位点前1000bp以内,而且靠近转录起始位点100bp范围内有两个GC盒(GGGCGG),通过TESS网站预测,发现大量转录因子结合位点,包括很多常见的转录因子如Sp1、GR、 YY1、C/EBPβ、TFIID的结合位点。这些特点预示着MAGEL2基因启动子可能是个强启动子,所以我们对其启动子活性进行了试验研究。3.通过亚克隆,载体构建等技术成功构建了MAGEL2基因启动子缺失片段荧光素酶报告基因表达载体pGL3-110、pGL3-261、pGL3-466和pGL3-1281。并利用细胞培养和瞬时转染技术,将上述载体转入HEK293细胞,通过荧光素酶活性检测分析了各启动子缺失片段的活性,结果表明,pGL3-110载体荧光素酶活性较低,和阴性对照没有显著性差异(P>0.05)；pGL3-261载体相对荧光素酶活性最高,pGL3-466和pGL3-1281载体的相对活性依次降低,但对荧光素酶活性显著性分析表明,pGL3-261和pGL3-466载体没有显著性差异(P>0.05),但是它们的相对活性极显著高于pGL3-1281和阳性对照pGL3-control (P<0.01),pGL3-1281和阳性对照pGL3-control的相对活性没有显著性差异(P>0.05)。表明0到-1171bp的启动子序列具较强的启动子活性。