毛韧革菌(Stereum hirsutum)的化学成分及代谢调控初探

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本文以从真菌中挖掘更多具有生物活性和结构新颖的次生代谢产物为目的,将毛韧革菌(Stereum hirsutum FP-91666)作为研究对象,对其不同培养条件下的化学成分进行了研究。而后利用生物信息学手段分析找出该菌中一个次生代谢产物候选调控基因,克隆得二章论述了毛韧革菌(S.hirsutum FP-91666)化学成分的研究,通过不同的培养条件,我们共分离鉴定了34个化合物,其中13个为新化合物。第三章是关于候选调控基因saraC的分析和研究,包括saraC的克隆和saraC/pBARGPE1载体的到该基因,并对其进行了表达载体的构建。本论文共由四章组成。第一章和第构建。第四章为综述部分,对真菌次生代谢产物挖掘的研究进行了简要综述。  在对毛韧革菌(S.hirsutum FP-91666)的化学成分研究中,利用正相硅胶、凝胶等分离材料,结合半制备型HPLC,通过核磁共振谱(包括1H&13C-NMR、HSQC、1H-1HCOSY、HMBC、ROESY)、质谱、紫外光谱等波谱学方法,我们从YMG固体发酵产物分离鉴定了11个化合物,化合物主要结构类型为苯环衍生物及甾醇类化合物,其中新化合物有2个。从YMG液体发酵产物中分离鉴定出23个化合物,其中包括9个倍半萜氨基酸杂合新骨架化合物,4个韧革菌素类化合物,2个倍半萜类化合物和1个环二肽化合物,韧革菌素类化合物为首次在该菌种中分离和鉴定。  在对毛韧革菌(S.Hirsutum FP-91666)的基因序列进行分析后,我们找出了一个次生代谢产物候选调控基因。通过提取其总RNA、反转录合成1st cDNA、特异引物PCR扩增,我们得到了saraC基因,并成功构建了其表达载体,为后续实验,包括saraC基因的过表达及其突变株代谢谱的研究奠定了基础。  综述部分概括论述了近十年真菌次生代谢产物挖掘的研究进展,其内容主要包括真菌中研究较为深入的次生代谢产物合成基因簇以及激活沉默基因簇的主要方法。
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