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补肾中药在预防和治疗骨质疏松时表现出类似于雌激素样作用,而对生殖系统的作用则不明显。这两种效应是否通过雌激素受体而起作用,一直是我们渴望探讨和解决的问题。本实验以雌激素样作用为线索,从整体、细胞、分子、基因等四个不同层面,对补肾中药醇提活性部位(AS-RKCB)进行了系统的研究。通过对骨密度、骨生物力学、成骨细胞标志物的检测和原位杂交技术,验证了AS-RKCB在体外和体内的促进成骨作用,阐明了发挥雌激素样效应的受体作用机制,揭示了通过促进成骨细胞分化关键基因——核心编码因子(cbfal)的表达,调节其下游基因产物骨钙素分泌的关系。结果如下: 1.AS-RKCB提高卵巢摘除小鼠股骨的骨密度,增强骨的结构力学性 能,减少骨转换率,促进骨形成,有效防止了因卵巢切除诱导的 骨质疏松。 2.AS-RKCB对生殖系统有弱雌激素样活性,但增加子宫湿重和OVX小 鼠阴道上皮细胞角化率的作用仅为雌激素的十分之一;对OVX小 鼠子宫组织有保护作用。D 第一军医大学博士研究生论文D13.AS亿KCB以时间剂量依赖方式促进TE85细胞增殖和碱性磷酸酶活 ll 性,是通过雌激素受体激活途径而起作用;AS亿KCB促进TE85D 细胞分泌骨钙素的机制与雌激素受体通路无关。」14.AS亿KCB促进成骨细胞分化关键基因Cbfal的表达,调节其下游基 lD 因产物骨钙素的分泌增加。D