论文部分内容阅读
研究目的:1、研究谷氨酸与U251细胞侵袭性的关系。2、研究谷氨酸与U251细胞分泌MMP-2及MMP-9的量的关系。3、研究谷氨酸与U251细胞表达EMMPRIN的量的关系。研究方法:1、体外培养人脑多形胶质母细胞瘤细胞株U251,用含100μM谷氨酸的DMEM和不含谷氨酸的DMEM分别处理U251细胞24小时, Matrigel Transwell方法检测两组U251细胞侵袭性的差异。2、用含100μM谷氨酸的DMEM和不含谷氨酸的DMEM分别培养U251细胞2小时、4小时、8小时、12小时后收集上清,用明胶酶谱分析(Gelatin Zymography )法检测两组U251细胞在不同时间段分泌MMP-2和MMP-9的量的差异。3、用含100μM谷氨酸的DMEM和不含谷氨酸的DMEM分别培养U251细胞3小时、6小时、9小时后收集细胞蛋白,蛋白印迹(Western blot)法检测两组U251细胞在不同时间段表达EMMPRIN的量的差异。研究结果:1. 100μM的谷氨酸组U251细胞穿膜细胞数(37.44±2.31)显著大于对照组U251细胞穿膜细胞数(25.89±3.00),差异具有统计学意义(P <0.05)。2.谷氨酸(100μM)处理U251细胞2小时、4小时、8小时及12小时后U251细胞分泌MMP-2和MMP-9的量与同期对照组U251细胞分泌MMP-2和MMP-9的量进行比较发现:谷氨酸组U251细胞分泌MMP-2的量从2小时到4小时较对照组U251细胞分泌MMP-2的量没有明显的差异,从8小时到12小时谷氨酸组U251细胞分泌MMP-2的量较对照组U251细胞分泌MMP-2的量明显增加(P<0.05);从2小时到12小时谷氨酸组U251细胞分泌MMP-9的量较对照组U251细胞分泌MMP-9的量没有明显的差异。3.谷氨酸(100μM)处理U251细胞3小时、6小时及9小时后发现谷氨酸组U251细胞EMMPRIN的表达量较同期对照组U251细胞EMMPRIN的表达量无明显差异。结论:在体外实验中,谷氨酸能增强胶质瘤U251细胞侵袭的能力;谷氨酸促进胶质瘤U251细胞分泌MMP-2,MMP-2可以降解细胞外基质蛋白,从而增强胶质瘤U251细胞的侵袭性,MMP-9与MMP-2具有非常相似的功能,在同样的处理条件下,谷氨酸不影响胶质瘤U251细胞分泌MMP-9,因此谷氨酸促进U251细胞分泌MMP-2是谷氨酸促进U251细胞侵袭的因素之一;EMMPRIN可促进胶质瘤细胞分泌MMP-2,而谷氨酸促进胶质瘤U251细胞分泌MMP-2不受EMMPRIN的调控。