microRNA-195通过靶基因HDGF抑制宫颈癌的肿瘤行为研究

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目的:宫颈癌被认为是妇科最常见的恶性肿瘤之一,同时严重危害妇女的身体健康。研究表明微小RNA(micro RNA,miRNA)与宫颈癌的发生发展有着密切的联系。本文通过研究宫颈癌组织中miRNA-195(miR-195)的表达特点,以明确作用机制。方法:利用qRT-PCR方法分别检测人宫颈癌组织与正常组织的miR-195的表达并进行比较。培养宫颈癌细胞,并转染miR-195以及其抑制物,采用MTT法、transwell小室法观察miR-195对宫颈癌细胞在细胞增殖、细胞迁移以及细胞侵袭方面的作用。筛选miR-195可能的靶基因并采用western blot法观察其表达及与miR-195的关系。结果:miR-195的表达在宫颈癌组织、细胞中均显著地下调。过表达miR-195能显著抑制细胞的生长。而抑制了miR-195则对细胞增殖具有相反的作用。miR-195的异常表达显著地抑制了He La和C33A细胞的迁移。而阻断miR-195的表达能增强He La和C33A细胞的迁移。过表达miR-195减轻了He La和C33A细胞的侵袭,而阻断miR-195的表达能增强He La和C33A细胞的侵袭。根据生物信息学分析预测,HDGF是miR-195的直接靶基因。根据western blot结果,在宫颈癌细胞中,HDGF显著上调。在He La和C33A细胞转染了miR-195 mimics以后,HDGF在m RNA水平不受影响;相反的,转染了miR-195 mimics以后,HDGF在蛋白水平下调,而转染了miR-195 inhibitor以后,HDGF在蛋白水平显著上调。结论:miR-195在细胞试验中抑制了宫颈癌细胞的增殖,迁移以及侵袭。确定了HDGF是miR-195的m RNA直接靶点。miR-195通过靶向调控HDGF进而发挥抑制宫颈癌细胞增殖,迁移以及侵袭行为。
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