【摘 要】
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甜瓜是一种重要的葫芦科农作物,它是世界十大名贵水果之一,被同本誉为"水果皇后",多年来一直是我国的出口创汇产品.但是甜瓜的抗逆性和抗病性都很差,尤其近几年,保护地的种植
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甜瓜是一种重要的葫芦科农作物,它是世界十大名贵水果之一,被同本誉为"水果皇后",多年来一直是我国的出口创汇产品.但是甜瓜的抗逆性和抗病性都很差,尤其近几年,保护地的种植面积迅速增加,使甜瓜病害问题越来越成为生产中的主要障碍.植物基因工程的兴起为甜瓜的病害防治开辟了一条新的途径.本文以新疆厚皮甜瓜K<,7>品系和网纹甜瓜(中蜜1号和中蜜2号)为材料,利用农杆菌介导法和花粉管通道法进行甜瓜的遗传转化研究,建立了甜瓜的遗传转化体系.首次利用本试验优化的快速再生体系导入了抗病基因,分子检测证明外源基因已经整合到甜瓜转基因植株的基因组DNA中.并首次利用花粉管通道法进行了GO基因和pGCE双价表达载体的遗传转化,得到了具有Kan抗性的转化植株,这在以往的文献中未见报道.本试验建立了以子叶为外植体通过激素浓度的梯度变化来刺激芽分化的快速再生体系,其中最好的再生体系是6-BA2.0mg/l的MS培养基培养5天,转移到6-BA1.0mg/l的MS培养基上培养5天,最后转移到6-BA0.5mg/l的MS培养基上培养.再生体系的芽伸长在6-BA0.5mg/l的MS培养基上即可.伸长>2cm的芽在NAA0.1mg/l的MS培养基上很快可以生根.这种体系不产生大量的愈伤组织,仅需要20~25天即可得到完整的植株.甜瓜作物的花器官大,结实量大,因此适合于使用花粉管通道法.本试验初步摸索了网纹甜瓜优质品种中蜜1号和中蜜2号使用花粉管通道法进行遗传转化的特性.试验中发现自交授粉后的24小时以内是注射质粒DNA的较适宜时间.用于注射的质粒DNA的最终浓度是0.1ug/ul.收获的种子经过Kan的初步筛选,发现部分种子具有Kan抗性,进一步的研究工作正在进行中.
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