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目的:骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)移植能促进脑缺血后神经功能的恢复,但其机制不是很明确。因细胞周期机制在脑缺血病理过程中起重要作用,故本实验研究BMSCs移植对大鼠缺血神经细胞表达细胞周期蛋白影响,探讨BMSCs移植促进神经修复的可能机制。方法:以线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),随机分成实验组(n=28)和对照组(n=28)。缺血再灌注6小时后,实验组尾静脉注射2×106 BMSCs。对照组注射等量PBS。并在注射后12h、24h、72h、7天用RT-PCR、免疫组化、Western Blotting等方法观察缺血皮层神经细胞周期蛋白cyclin D1、cdk4、PCNA、p27及phospho-pRb(ser-795)的动态变化。结果:细胞周期蛋白cyclin D1和cdk4在大鼠脑缺血再灌注12h后表达开始上调,24h达到高峰,7d后开始下降。PCNA与phospho-pRb(ser-795)的表达具有相似的变化。在BMSCs移植后, cyclin D1、cdk4、PCNA、phospho-pRb(ser-795)表达均下调。而细胞周期内源性cdk抑制物p27的表达正好相反。结论:BMSCs移植后,缺血皮层表达细胞周期蛋白表现为cyclin D1/cdk4/pRb水平的下调和p27水平的上调。该变化可能是BMSCs调节细胞周期作用的结果。目的:在脑损伤后,骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)能减少星型胶质细胞的凋亡,减轻胶质细胞反应,减少胶质疤痕的形成。但两者相互作用的具体机制不明确。本研究主要探讨BMSCs对受损星型胶质细胞的细胞周期影响。方法:体外培养星型胶质细胞,以谷氨酸(Glu,100mM)孵育12h诱导损伤模型。实验把星型胶质细胞分成4组:1)正常培养组,2) Glu处理组, 3) Glu处理后与BMSCs共培养组, 4) Glu处理后与BMSCs共培养+ L-Canavanine(iNOS抑制剂)组。在BMSCs与星型胶质细胞共培养24h后,流式细胞仪分别检测4个实验组中星型胶质细胞的细胞周期变化,用RT-PCR、免疫荧光、Western Blot等方法观察cyclin D1、cdk4、p27、PCNA等细胞周期蛋白的表达变化。结果:体外的研究表明星型胶质细胞在诱导损伤后,cylin D1、PCNA和cdk4的表达增加,周期素依赖性激酶抑制物p27下调。而与BMSCs共培养后,可使星型胶质细胞阻滞在S期,同时cylin D1、PCNA、cdk4的表达下降,p27表达上调。L-canavanine可部分解除BMSCs对星型胶质细胞的细胞周期抑制作用。结论: BMSCs能下调损伤星型胶质细胞中cyclin D1、cdk4和PCNA的表达,上调p27的水平,具有细胞周期抑制作用。在这过程中NO发挥了部分作用,该作用也能用来解释BMSCs移植减少胶质疤痕产生的现象。