氯霉素(chloroamphenicol，CAP)、恩诺沙星(enrofloxacine，ENR)和环丙沙星(ciprofloxacine，CPF)3种抗生素曾广泛应用于畜禽、水产养殖中，防治各种感染性疾病，均对人体有较大危害，许多国家已禁止或限制其在动物生产中的应用。化学发光酶联免疫分析法(chemiluminescence enzyme-linked immunoassay，CLEIA)是近年来快速发展的一种新型免疫分析技术，具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点，适用于动物组织的现场大批量的快速筛选检测。因此本文以上述3种抗生素为研究对象，系统地研究了CLEIA法，研制了试剂盒，并按照标准方法对试剂盒进行质量评价。主要研究结果如下：　　(1)建立了氯霉素dcCLEIA检测方法，反应条件优化的结果为：最佳包被抗体浓度为200 ng/mL，最佳酶标抗原稀释倍数为8000倍，酶标抗原稀释液为P液，抗原抗体反应时间为30 min，标准品稀释液为0.01 mol/L的PBS溶液。研制的氯霉素deCLEIA试剂盒的半抑制浓度IC50为0.08 ng/mL，线性范围(IC20～IC80)为0.033～1.54 ng/mL，灵敏度IC10为0.017 ng/mL；氯霉素与结构类似物交叉反应率均小于1％；在蜂蜜、牛奶、虾肉和鱼肉中的添加回收率分别为87.0％～108.5％、91.2％～118.0％、96.8％～113.6％。板内、板间、批内和批间变异系数均小于15％；试剂盒可在4℃保存6个月以上；采用ELISA法为参照方法与CLEIA分析结果进行对比，相关系数R2为0.9605。　　(2)建立了恩诺沙星icCLEIA检测方法，反应条件优化的结果为：最佳包被抗原浓度为200 ng/mL，最佳抗体稀释倍数为2000倍，最佳抗体稀释液为P液，最佳抗原抗体反应时间为30 min，最佳标准品稀释液为0.01 mol/L的PBST溶液，最佳酶标二抗稀释浓度为100 ng/mL，最佳酶标二抗稀释液为P液，最佳酶标二抗反应时间为15 min。研制的恩诺沙星试剂盒的半抑制浓度IC50为0.11 ng/mL，线性范围(IC20～IC80)为0.024～2.76 ng/mL，灵敏度IC10为0.013 ng/mL；恩诺沙星与结构类似物交叉反应均小于2％；在蜂蜜、牛奶、虾肉和鱼肉中的添加回收率分别为85.3％～105.6％、81.5％～104.2％、93.6％～113.0％和85.8％～115.3％。板内、板间、批内和批间变异系数均小于15％；试剂盒可在4℃保存6个月以上。采用HPLC法作为参照方法与CLEIA分析结果进行对比，相关系数R2为0.9899。　　(3)建立了环丙沙星icCLEIA检测方法，反应条件优化的结果为：最佳包被抗原浓度为125 ng/mL，最佳抗体稀释倍数为3000倍，最佳抗体稀释液为T液，最佳抗原抗体反应时间为30 min，最佳标准品稀释液为0.01 mol/L的PBST溶液，最佳酶标二抗反应时间为15 min。研制的试剂盒半抑制浓度IC50为0.65 ng/mL，线性范围(IC20～IC80)为0.25～10.28 ng/mL，灵敏度IC10为0.14 ng/mL；环丙沙星与结构类似物交叉反应均小于15％；在蜂蜜、牛奶、鱼肉和虾肉中的添加回收率分别为87.5％～107.6％、91.4％～112.8％、85.2％～110.4％和87.6％～113.4％。板内、板间、批内和批间变异系数均小于15％。实验试剂均可在4℃保存6个月以上。采用HPLC法为参照方法与CLEIA分析结果进行对比，相关系数R2为0.9729。