西兰花籽中萝卜硫苷提取分离工艺研究

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萝卜硫苷是硫代葡萄糖苷的一种,其主要降解产物萝卜硫素,是迄今为止从蔬菜中发现的抗癌活力最强的一类异硫代氰酸盐。萝卜硫苷在西兰花籽中含量丰富,达20~50mg/g。国内外都有研究者试图以萝卜硫苷提取物为原料,开发保健食品和药品。但是,萝卜硫苷开发利用的前提之一是获得大批量的标准提取物。本研究以西兰花籽为原料,尝试构建萝卜硫苷的精确测定方法,优化面向批量制备的提取分离工艺,研究结果如下:1、建立了萝卜硫苷HPLC检测新方法采用Global Chromatography SP-120-5-C18-AP色谱柱,Waters2487紫外检测器,检测波长为229nm,以甲醇∶水=1∶9(含0.1%甲酸,pH=4.0)作为流动相,流速为1.0mL/min。在该液相色谱条件下,萝卜硫苷与杂质峰的分离度可提高到2.54,加样回收率达99.45%。该方法适用于萝卜硫苷的精确定量。2、优化了萝卜硫苷初提工艺西兰花籽(含萝卜硫苷18.61mg/g)经灭酶、破碎、脱脂、干燥预处理后,以80%的甲醇水为提取溶剂,料液比1∶20(g/mL),在70℃下提取20min,萝卜硫苷提取率达92.84%。3、优化了萝卜硫苷初提物分离工艺采用离子交换法对初提物进行分离,发现D315大孔阴离子树脂对萝卜硫苷具较佳吸附效果,以0.5mol/L氯化钠水溶液为洗脱剂,当上样量体积为离子交换树脂重量20倍时(g/mL),萝卜硫苷分离工序的提取率可达89.36%,洗脱液经浓缩干燥后所得的近白色粉末中萝卜硫苷含量达245.60mg/g。提取分离两工序的总提取率为82.96%。
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