产肉率是肉鸡育种的重要经济性状,筛选、验证相关的功能基因是开展分子辅助育种的基础。在前期的研究中,已利用60KSNP芯片,在北京油鸡群体中筛选出与胸肌重、腿肌重显著相关的突变位点及候选基因。本研究选择显著相关的四个基因,通过在成肌细胞增殖分化期、胚胎期和肌肉生长发育不同阶段mRNA的时空表达特性分析,阐明其与肌肉生长发育的关系,为鉴定基因功能提供理论依据。　　1、组织特异性表达。检测了4个候选基因在14日龄北京油鸡心肌、胸肌等10个组织中mRNA表达量。NCOA7、MYCN和HDAC2在腿肌中的表达均高于其他各组织,GJA1在肌胃、心脏组织中有较高的表达。　　2、胚胎期至生长发育期的时空表达特性。以北京油鸡为素材,取孵化14至21胚龄各6枚鸡胚胸肌和腿肌组织;采集出雏至生长98日龄(0,28,56,70,84和98日龄)各10个个体的胸肌和腿肌组织。利用Q-PCR技术检测mRNA表达量。结果表明:NCOA7在4个胚龄的胸肌和腿肌组织中表达呈先上升后下降趋势,18胚龄表达量最高(P<0.05);出雏后0-98日龄生长阶段在胸肌中表达量呈先上升后下降趋势,56日龄表达丰度最高;MYCN在胚胎期胸肌中的表达呈上升趋势,0-28日龄胸、腿肌中表达量呈急剧下降趋势,28日龄后变化不显著,并维持在较低水平;HDAC2与MYCN具有类似的变化趋势;GJA1在胚胎发育后期胸、腿肌中表达呈先上升后下降趋势,出生后胸肌中0-28日龄阶段的表达量无显著差异,以后呈现持续上升趋势。　　3、成肌细胞增殖分化期的表达特性。取16胚龄的SPF鸡胚,分离获得原代成肌细胞培养72h,收集细胞检测增殖期候选基因表达情况。当细胞生长至80％时,更换为含5%马血清的DMEM培养基进行诱导分化,并收集12-120h的成肌细胞检测分化期基因的表达。结果显示:NCOA7、MYCN、HDAC2在增殖期的成肌细胞中表达量显著低于分化后期的成肌细胞中的表达量(P<0.05)。随着诱导分化时间的延长,3个基因表达量均发生变化,96h表达丰度最高,以后下降。GJA1在增殖期成肌细胞中的表达量极显著高于分化期(P<0.01),随着诱导分化时间的延长呈波动变化,96h表达丰度最高。　　4、丙戊酸(VPA)抑制HDAC2基因表达对成肌细胞增殖与分化的影响。正常培养的成肌细胞均分成两组,一组添加终浓度为1mol/mLVPA,另一组为对照,检测增殖期与分化期HDAC2和肌肉发育特异性调控因子PAX7等基因的表达。发现添加VPA后,PAX7基因表达上调,在0-72h内,VPA处理组的细胞增殖能力显著高于对照组;添加VPA组在分化0-120h内HDAC2各个时间点(12,24,48,72,96和120h)的表达量均低于对照组;MYOD与MYOG的表达量显著下调。这一结果说明,抑制HDAC2的表达可以提高成肌细胞增殖能力,而降低分化能力,揭示了HDAC2在成肌细胞发育过程中可能发挥着抑制细胞增殖,促进细胞分化的功能。　　综上,四个候选基因均参与了肌肉生长发育的调控,推测NCOA7,MYCN,HDAC2基因主要在胚胎发育后期和生长28日龄之前发挥功能;GJA1基因主要对生长28日龄之后肌肉发育具有调控作用。