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随着原油泄漏事故频繁发生,原油对生态系统的影响,特别是对生物体的影响受到r学术界的广泛关注。当前对溢油事故毒性评价和修复效果评价多集中于原油对受试生物的急性半数致死浓度和致畸率等方面,而对全生命周期和亚致死水平的研究较少。溢油对生态系统的影响常常是多层次的,目前却很少有生物能够同时评价水体和沉积物中原油的毒性。秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)既能生活在土壤中,又能生活在土壤孔隙水中:通体透明,在显微镜下可观察到清晰的生殖结构和运动行为;由卵发育为成虫仅需三天时间,暴露三天即可涵盖全生命周期:具有完善的抗氧化系统。因此,为了对当前原油毒性评价方法进行优化,本文选取秀丽隐杆线虫作为评价生物,根据24h半数致死浓度确定原油水溶液的亚致死暴露浓度,以线虫子宫内怀卵数、阴门结构和3d内产子代数作为评价指标,对原油的生殖毒性进性评价;以运动和摄食指标对原油的行为毒性进行评价;以线虫体内抗氧化防御系统活性为指标评价原油氧化毒性。从全生命周期的角度利用生殖指标、行为指标和抗氧化防御系统指标,在亚致死水平对原油毒性进行系统性评价。本文主要结论如下:(1)原油水溶液对秀丽隐杆线虫的24h-LCso是6.957g/L。(2)7、70和700mg/L的原油水溶液暴露秀丽隐杆线虫24h后,各浓度组秀丽隐杆线虫阴门畸形率均显著上升,70和700mg/L组线虫的怀卵数显著减少,暴露72h后70和700mg/L组线虫的子代数显著减少。结果表明秀丽隐杆线虫的生殖指标是评价原油生殖毒性的敏感指标。(3)7、70和700mg/L的原油水溶液暴露秀丽隐杆线虫24h后,700mg/L组对线虫向前摆动和头部摆动具有显著抑制效应:原油水溶液暴露线虫2h后,700mg/L组摄食率显著降低:70mg/L组暴露3h后摄食率显著降低。结果表明秀丽隐杆线虫的运动和摄食指标是评价原油行为毒性的敏感指标。(4)7、70和700mg/L的原油水溶液暴露秀丽隐杆线虫24h后,过氧化氢浓度在700mg/L组显著上升,而添加抗氧化剂维生素E预处理的700mg/L组,过氧化氢浓度下降至与对照组无显著性差异。70和700mg/L组丙二醛浓度显著上升,而添加维生素E预处理的700mg/L组与对照组相比无显著差异;过氧化氢酶活性在添加维生素E预处理的700mg/L组显著上升:超氧化物歧化酶的活性在70和700mg/L组均显著上升,在添加维生素E预处理的700mg/L组显著高于其余各组;原油对谷胱甘肽过氧化物酶的活性无影响。结果表明秀丽隐杆线虫抗氧化防御系统活性对原油毒性敏感,是评价原油氧化毒性的理想指标。综上所述,秀丽隐杆线虫的生殖(怀卵数、子代数和阴门畸形率)、运动(向前摆动和身体弯曲)、摄食量、氧化产物浓度(过氧化氢和丙二醛)和抗氧化防御系统(过氧化氢酶、超氧化物歧化酶)对原油的毒性反应敏感。相比于其他生物,秀丽隐杆线虫的生殖周期短,培养方法简单,可以用于土壤、淡水和沉积物的原油污染评价。本实验能够为原油污染评价和修复效果评价提供毒性数据,为应急预案的制定提供依据。