双价抗虫基因转化杨树的研究

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以美洲黑杨×小叶杨(Populus deltoides ×Populus simonii)优良无性系NL-80106为材料,研究了影响根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) LBA4404介导的杨树遗传转化的若干因素,建立了杨树杂种NL-80106简单、高效的遗传转化系统.其中适当时间的暗培养(7天),能显著提高杨树NL-80106的转化频率.利用此遗传转化系统,采用双基因共转化法,将经过改造的Bt.CryIAA基因和豇豆胰蛋白酶抑制剂CpTI基因转八杨树NL-80106基因组中,共儿得154株转化杨树NL-80106基因组中,共获得154株转化植株.部分转基因植物的杀虫实验表明,转基因植株对一龄舞毒蛾(Lymantria dispar)有明显抗性,部分饲喂转基因植株叶片的幼虫死亡率显著高于未转基因对照,其取食面积小,存活幼虫的生长和发育均受到明显抑制.饲喂转双基因植株BC55和BC5的叶片,在杀虫实验第13天幼虫的校对死亡率分别达到88.7﹪和75.5﹪.转双价抗虫基因杨树植株的获得, 为延缓害虫产生抗性,选育高效、广谱和持狼的杨树抗虫新无性系提供了材料.
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