高盐对幽门螺旋杆菌粘附相关基因表达以及粘附能力的影响

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目的幽门螺旋杆菌是全球广泛流行的严重危害人类健康的革兰氏阴性杆菌。幽门螺旋杆菌粘附定植于胃黏膜之后,进行大量增殖,并且毒力因子CagA通过T4SS系统进入细胞内。研究发现高盐可以导致更多的CagA进入细胞。本研究旨在探讨不同盐浓度对幽门螺旋杆菌黏附能力以及粘附相关基因表达的影响。方法用选择性的固体培养基进行幽门螺旋杆菌培养。采用革兰氏染色对幽门螺旋杆菌进行染色,并在显微镜下观察不同盐浓度对其形态学的影响。用TRIzol提取总RNA,用实时定量PCR (qRT-PCR)检测不同时间点和不同盐浓度下粘附相关基因babA2、sabA、alpA/B、oipA、hopZ的表达。采用Skindersoe等学者开发的定量检测粘附能力的方法检测高盐对幽门螺旋杆菌的粘附能力的影响。采用SPSS 19进行数据统计分析。结果高盐能够抑制幽门螺旋杆菌的增殖,随着盐浓度的增加,球形的幽门螺旋杆菌比例越来越大。qRT-PCR的结果显示,在48小时,粘附相关基因babA2、sabA、 alpA/B、oipA、hopZ的表达随着盐浓度的增加而上升,具有统计学意义(P<0.05);在24和72小时,粘附相关基因的表达并没有统一的规律。选择在不同盐浓度培养基中培养48小时的幽门螺旋杆菌和胃癌细胞SGC-7901进行粘附实验,结果发现在不同的感染指数(MOI为100:1和200:1)时,高盐对幽门螺旋杆菌粘附细胞的能力没有明显影响(P>0.05)。结论高盐能够抑制幽门螺旋杆菌的增殖,随着盐浓度的增加,球形的幽门螺旋杆菌比例越来越多。在48小时,粘附相关基因babA2、sabA、alpA/B、oipA、hopZ的表达随着盐浓度的增加而上升。幽门螺旋杆菌的粘附能力不随着盐浓度的增加而升高。
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