烟粉虱(Bemisia tabaci)广泛分布于全球,且具有显著的遗传多样性。最新的分子种系发生分析和杂交试验结果表明,烟粉虱是一个物种复合体,包含35个以上的隐种。近年来,烟粉虱Mediterranean (MED)继Middle East-Asia Minor1(MEAM1)后,在世界范围内广泛入侵和扩散。Hu等(2011)的田间调查结果表明,中国境内分布有15个烟粉虱隐种,分别为入侵隐种ME AM1和MED以及13个土著隐种。在某些省份,MED已取代MEAM1成为优势种群。针对烟粉虱物种复合体基础研究和治理的需要,本研究开展了两方向的探讨：(1)构建一种经济高效的烟粉虱隐种鉴别方法；(2)在已有工作的基础上,继续开展烟粉虱推测隐种间的杂交试验,分析它们相互之间的生殖隔离程度。1.隐种分子鉴别方法快速、高效的鉴别方法对于掌握烟粉虱田间发生规律及制定相关防控策略具有重要意义。然而到目前为止,除了mtCOI基因测序比对外,尚未有一种简便的方法可以有效地区分多个烟粉虱隐种,但mtCOI基因测序需时长、费用高,难以用于大批量标本的快速鉴定。鉴于此,本研究探讨采用mtCOIPCR-RFLP技术对中国境内分布的9个常见烟粉虱隐种进行鉴别的方法。主要研究结果如下：采用mtCOIPCR-RFLP技术,单独或组合使用Taq I、 VspI、 Van91I、 NcoI、 FokI这5种限制性内切酶,酶切烟粉虱mtCOI的PCR扩增片段可对中国境内分布的9个烟粉虱隐种进行鉴别。试验结果表明,单独使用TaqI酶切,可鉴别出MEAM1和China1,使用TaqI+NcoI分步酶切可鉴别出MED和Asia I,使用TaqI+Van91I分步酶切可鉴别出Asia Ⅱ3和Asia Ⅱ9,使用TaqI+VspI+FokI分步酶切可鉴别出Asia Ⅱ1、 Asia Ⅱ6和Asia II7。因此,应用这一技术可对中国境内的9个烟粉虱隐种进行鉴别,与采用mtCOI基因测序方法相比,可节约时间80%,节约经费高达98%以上。2.推测隐种之间的杂交试验在中国分布的烟粉虱隐种当中,目前已在两个入侵隐种(MEAM1和MED)和4个土著隐种(Asia Ⅱ1、 Asia Ⅱ3、Asia Ⅱ7和China1)之间进行了杂交试验,但上述6个隐种和其他9个土著隐种间的生殖隔离程度尚不清楚。为了更全面地了解中国境内分布的烟粉虱隐种间的生殖隔离程度,本研究从野外采集并建立了Asia Ⅰ和Asia Ⅱ6两个隐种的试验种群,分别选取了与其进化距离不同的3个烟粉虱隐种进行了杂交试验,以明确这些隐种间的生殖隔离情况。主要研究结果如下：(1) Asia I隐种与Asia Ⅱ7、 China1、 MED3个隐种之间的杂交试验在本实验室已有的烟粉虱隐种种群中,与Asia Ⅰ进化距离为远、中、近的3个隐种分别为MED、 Asia Ⅱ7和China1。共设计进行了4个种内交配处理和6个种间杂交组合,结果种内交配处理的后代中雌性比例为56-66%,而种间杂交组合的后代中均没有雌性个体,表明Asia Ⅰ与另3个隐种之间无论进化距离远近,皆存在完全的生殖隔离。(2) Asia Ⅱ6隐种与Asia Ⅱ1、 China1, MED3个隐种之间的杂交试验在本实验室已有的烟粉虱隐种种群中,与Asia Ⅱ6进化距离为远、中、近的3个隐种分别为MED, China1和Asia Ⅱ1。共设计进行了4个种内交配处理和6个种间杂交组合,结果种内交配处理的后代中雌性比例为52-60%,而种间杂交组合的后代中均没有雌性个体,表明Asia Ⅱ6与另3个隐种之间无论进化距离远近,皆存在完全的生殖隔离。综上所述,本研究利用mtCOI PCR-RFLP技术成功鉴别了中国境内分布的9个常见烟粉虱隐种,为高效鉴别中国境内的多个烟粉虱隐种提供了方法；并且通过严格的杂交试验证明,Asia Ⅰ和Asia Ⅱ6分别与其他3个进化距离不同的隐种之间皆存在完全的生殖隔离,从而为证明烟粉虱是一个物种复合体又提供了更多证据。