两个早熟葡萄芽变品种生物学特性研究与分子鉴定

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试材’98-2’(Vitis vinifera cv.98-2)和‘洛浦早生’(V.vinifera cv. Luopuzaosheng)为河南科技大学园艺系分别从‘巨峰’(V.vinifera cv. Kyoho)和‘京亚’(V.vinifera cv. Jingya)中选育的早熟葡萄芽变新品种(系)。本研究对‘98-2’和‘洛浦早生’与其亲本的植物学和生物学特性及果实成熟过程中矿质元素、激素、糖、酸的变化以及分子鉴定等方面进行了研究,探讨了芽变品种(系)与亲本上述特性的差异,取得以下主要结果:1.通过对芽变品种(系)与其亲本的诸多植物学性状和生物学特性指标的比较分析,发现两个芽变品种(系)在果实大小、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、物候期、果穗及果粒呼吸强度和乙烯释放量等方面均有不同程度的差异,以果实成熟期差异较为明显。果实发育期,‘98-2’比‘巨峰’少36 d左右,‘洛浦早生’比‘京亚’少20 d左右。2.果实发育期间矿质元素变化研究表明,在幼果期果实中除Ca外,其它元素的含量均是‘巨峰’高于‘98-2’;‘洛浦早生’除Fe、Zn、N、P、K等矿质元素外,其余均高于‘京亚’。此后,随着幼果的快速增大,因稀释作用,使多数矿质元素含量逐渐下降。进入果实迅速膨大期后,只有Mn元素出现一个较大值,其它大多数矿质元素平稳递减。在果实成熟时,‘98-2’果实中Zn、Ca、Mg、P、K、元素的含量高于‘巨峰’,其余则为巨峰高于‘98-2’;而‘洛浦早生’除Cu、Zn、Mg、P元素外,其余均是‘京亚’为高。3.果实发育期果肉中IAA、GA3、ZR、ABA的含量变化趋势相似,都是一个单峰曲线,在果实缓慢生长期开始前后即花后30 d或40 d达到较大值,但较大值出现时期与成熟期早晚无关。果皮中IAA、GA3、ZR的含量变化趋势相似,都有一明显的较大值,两个芽变品种(系)的较大值均低于亲本,且较大值出现时间可能与成熟期早晚有关;果皮中ABA含量‘98-2’高于‘巨峰’,‘洛浦早生’其含量低于‘京亚’,果皮中ABA含量在果实发育的后期含量较高,但成熟期不同的品种高含量ABA所持续的时间不同。4.果实发育期除蔗糖外,果肉中果糖、葡萄糖及总糖的含量变化‘98-2’与‘巨峰’有差别,‘洛浦早生’和‘京亚’相似。‘巨峰’果肉中果糖、葡萄糖及总糖的含量在花后40 d前增加缓慢,以后则迅速增加直到果实成熟:‘98-2’和‘京亚’分别在花后50 d、‘洛浦早生’在花后40 d以后果肉中果糖、葡萄糖及总糖的含量开始降低直到果实成熟,但‘洛浦早生’果实发育后期果糖、葡萄糖及总糖的含量均高于‘京亚’果皮中果糖、葡萄糖及总糖的含量变化‘98-2’、‘巨峰’、‘洛浦早生’、‘京亚’相似。花后30 d内4个品种果皮中果糖、葡萄糖及总糖的含量变化不大,以后则逐渐上升直到果实成熟,且在果实成熟时芽变品种(系)果皮中果糖、葡萄糖及总糖的含量均低于亲本。果实发育期转化酶均在果实糖分开始快速积累前后活性达到最大,‘洛浦早生’与‘京亚’变化较一致,而‘98-2’与‘巨峰’差别较大。5.无论芽变品种(系)和亲本,果实中酸的含量均以酒石酸、苹果酸最多,柠檬酸次之,草酸最低。果肉中4个品种苹果酸含量随果实生长发育逐渐上升,在果实发育中期上升到较大值,成熟期则下降,且芽变品种(系)的苹果酸含量均低于亲本;而果皮中苹果酸含量只有‘98-2’前期高于亲本,其余则和果肉的变化趋势一样。果肉、果皮中的酒石酸含量,在生长至成熟过程中均呈下降趋势,且芽变品种(系)酒石酸含量均低于亲本。果肉中总酸含量与苹果酸变化趋势相似,果皮中则与酒石酸相似。6.利用RAPD分子标记技术对两个芽变品种(系)与亲本的DNA差异进行了分析,发现S56的PCR产物中条带1300 bp在‘98-2’中出现,而‘巨峰’中没有出现,S234的PCR产物中条带950 bp只在‘京亚’中出现,而‘洛浦早生’中出现条带1320 bp。利用SSR标记,引物VRZAG25和VVS2分别在巨峰及其芽变98-2,京亚及其芽变洛浦早生的PCR产物中出现510bp和290bp的差异条带。从分子证据上表明它们是不同的品种,证明了它们具有芽变关系的可能。7.‘98-2’、‘巨峰’、‘京亚’与‘洛浦早生’的花粉粒形态相似;只是‘98-2’较细长,‘巨峰’较粗短;‘京亚’与‘98-2’、‘洛浦早生’的花粉形状也略有不同。花粉的萌发率‘98-2’低于‘巨峰’,‘京亚’高于‘洛浦早生’。8.‘98-2’与‘巨峰’的POD同工酶谱存在差异,‘98-2’与‘巨峰’相比多了一条P3带而少了一条P6带,而且P4、P5为强带。表明‘98-2’和‘巨峰’不是同一种种质,它们的遗传物质不完全相同。而‘洛浦早生’和‘京亚’的同工酶谱完全相同。
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