植物激素作为一类小分子化合物,在植物的生长发育调控中发挥着非常重要的作用,根据它们结构和生理功能的不同主要分为以下五类:生长素(IAA)、细胞分裂素(CKS)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GAs)和乙烯(ET)。它们在植物的整个生命周期中起着关键的作用,包括细胞的分裂、扩大和分化,器官的发育,种子的休眠和萌发,叶子的衰老和脱落等。植物激素在植物组织中的含量往往为超痕量水平,通常在pg/g-ng/g鲜重(FW)范围内,而且周围共存的基体成分非常复杂,几乎不可能同时分析所有植物激素。因此,如何精确可靠地对超微量的植物激素进行定性和定量分析,已成为目前植物激素作用机理研究中的重要问题之一。色谱技术凭借其简单快速而且高效的特征得到了广泛的应用,色谱与质谱结合,特别是液相色谱与质谱联用的方法不仅提供了高效的分离手段和基于碎片模式的结构信息,同时也显著提高了检测灵敏度。本论文基于以上理论,建立了高效液相及高效液相色谱与质谱联用技术检测植物激素的方法,以及一种基于化学衍生化技术的LC-MS分析有机酸的方法。对水果蔬菜中的部分植物激素和有机酸进行了分析检测,取得了较满意的结果。具体研究内容如下:1.3-吲哚乙酸,3-吲哚丁酸,1-萘乙酸,脱落酸等四种植物激素的HPLC分析条件的研究及应用建立了一种高效液相色谱法(HPLC)用于分离和测定吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、脱落酸(ABA)、萘乙酸(NAA)等4种植物激素,采用Eclipse XDB-C8(4.6 mm×250 mm,5μm)反相色谱柱,V(甲醇):V(甲酸-甲酸铵水溶液)=70:30,流速为1.0 m L/min,进样量为5μL;柱温25℃,检测器波长设置为280 nm,结果表明,四种激素的分离效果理想,在线性范围内的相关系数(R)为0.9979-0.9983,检出限为0.03-0.1μg/mL,加标回收率达到95.8%-104.6%,相对标准偏差均不高于0.53%,用该方法检测到豆芽中的3-吲哚乙酸为16.8 mg/kg,鸭梨中的脱落酸为5.0 mg/kg。2.HPLC-MS联用技术对两种赤霉素类植物激素分析方法的研究本方法使用Hilic C18(2.1 mm×50 mm,2.6μm)色谱柱,以甲醇:水(0.01 mol/L醋酸铵)=80:20,流速0.2 m L/min条件下分离,采用电喷雾-负离子多反应监测模式,外标法定量。选择确定GA3、GA12母离子依次为m/z 345.3、331.4,定量子离子依次为m/z 143、220.9,201、269.2,结果表明:该方法在0.05~10.0μg/mL线性范围内有良好的线性关系(R2>0.99),检测限为0.01μg/m L,在0.2、1.5、8μg/mL 3个添加水平下,平均回收率在81.7%~103.2%之间,相对标准偏差(RSD)在0.26%~1.9%之间。3.基于化学衍生化技术的LC-MS方法在有机酸分析中的研究与应用本方法首先对2种有机酸进行化学衍生,取有机酸,Na2CO3,2-溴苯乙酮(摩尔比1:1:1)各500μL加入到50 mL的烧瓶中,混合均匀,于55℃油浴下反应24 h,反应冷却后取样进LC-MS分析。使用Agilent C18(2.1 mm×150 mm,5μm)反相色谱柱,流动相V(甲醇):V(0.1%乙酸水溶液)=60:40;流速为0.2 mL/min,进样量为5μL,采用电喷雾-正离子监测模式,结果表明:两种有机酸经衍生化后在各自线性范围内的相关系数(R)为0.9754-0.9966,检出限各为6.67μg/mL和2.33μg/m L,回收率在81.9%-91.0%之间,用本衍生方法测得苹果汁的苹果酸为15.3μg/mL,柠檬汁中的柠檬酸为19.4μg/mL。