手针与电针对慢性应激抑郁大鼠模型不同脑区BDNF和Caspase-3表达的影响

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抑郁症(depression)是危害人类身心健康的常见病,为全球性的精神卫生问题。随着社会经济的发展和疾病谱的改变,抑郁症对人类健康、社会稳定及经济发展造成了巨大的影响。因此,抑郁症的研究越来越受到人们的重视。针刺疗法是中医学的重要组成部分。临床实践表明,针刺疗法可以在一定程度上缓解抑郁症患者的症状,且无明显副作用。手针与电针是临床针刺治疗抑郁症的常用方法,但对二者的作用机理和途径是否存在异同,尚缺少关注和研究。抑郁症的发病机制至今未彻底阐明。抑郁症的发病与神经元的存活和凋亡的有关。因此本课题选择慢性应激抑郁大鼠模型,观察手针和电针对不同脑区BDNF和Caspase-3表达影响。以期比较两种针刺方法途径的影响。研究方法和结果1建立慢性应激抑郁模型,并采用旷场试验、糖水实验、体重来综合评价模型复制是否成功。3周慢性应激程序结束后,模型组大鼠的体重变化、糖水摄入量均明显低于正常组(P<0.01),旷场试验的水平穿越格数低于正常组(P<0.05);与模型组相比,体重变化、旷场试验的水平穿越格数、竖立次数,模型+手针组、模型+电针组均明显高于模型组(P<0.01);与模型组相比,糖水摄入量,模型+手针组、模型+电针组均高于模型组(P<0.05);而旷场试验的水平穿越格数、竖立次数,模型组与模型+帕罗西汀组之间没有差异(P>0.05);模型+手针组与模型+电针组上述指标之间没有差异(P>0.05)2在大鼠模型复制成功的基础上,采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)方法检测不同脑区脑源性神经营养因子(BDNF) mRNA和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3) mRNA表达变化。结果显示:(1)大鼠海马组织中模型组BDNFmRNA的表达低于正常组(P<0.05);同时模型+手针组、模型+帕罗西汀组高于模型组(P<0.05)模型+电针组明显高于模型组(P<0.01)。大鼠额叶皮层中模型组明显低于正常组(P<0.01),同时模型+手针组、模型+帕罗西汀组高于模型组(P<0.05)。而模型+电针组与模型组之间没有差异(P>0.05)。(2)大鼠额叶皮层和海马组织中模型组Caspase-3mRNA的表达高于正常组(P<0.05),而大鼠海马组织中模型+手针组、模型+电针组及模型+帕罗西汀组与模型组之间没有差异(P>0.05);额叶皮层中模型+手针组、模型+帕罗西汀组与模型组之间没有差异(P>0.05);模型+电针组与模型组有显著性差异(P<0.05)3在大鼠模型复制成功的基础上,采用免疫组织化学方法观察不同脑区BDNF和C aspase-3表达变化。结果显示:(1)海马和额叶皮层中,BDNF的免疫反应阳性细胞表达观察到,正常组的阳性细胞表达明显;正常+手针组的阳性细胞表达增加;模型组的阳性细胞比正常组有低水平的表达;模型+手针组、模型+电针组、模型+帕罗西汀组的阳性细胞表达均比模型组有所增加。(2)海马和额叶皮层中,Caspase-3免疫反应阳性细胞表达观察到,正常+手针组表达低于正常组,模型组表达有所增加,模型+手针组、模型+电针组、模型+帕罗西汀组表达比模型组水平低。4采用Nissle染色方法观察各组海马及额叶皮层神经元形态。正常组:海马整体轮廓清晰、额叶皮层细胞排列整齐,层次紧密,尼氏体深染。正常+手针组:海马轮廓清晰、尼氏深染、额叶皮层细胞排列密集。模型组:额叶皮层细胞排列松散,细胞缺失。模型+手针组:海马形态清楚、额叶皮层细胞排列整齐、尼氏体浅染。模型+电针组:海马形态清楚,额叶皮层细胞较为紧密,细胞数目有所减少、尼氏体浅染。模型十帕罗西汀组:海马形态清晰,额叶细胞紧密,着色清晰,尼氏体深染。结论1行为学测试结果提示行为学的改善证明慢性应激抑郁模型复制成功,慢性应激可以引起动物探究活动减少、兴趣减低,体重减少,而手针及电针干预可以改善慢性应激大鼠的抑郁行为,具有抗抑郁的效果。2慢性应激可以导致大鼠脑组织BDNF表达的降低,影响神经元的存活,而手针及电针干预可以BDNF表达水平增加,保护脑内神经元的损伤及细胞再生减低,发挥抗抑郁效应。3慢性应激可以提高Caspase-3在脑组织的表达水平,促进脑组织的细胞凋亡,而手针及电针干预可以降低Caspase-3的表达,较少细胞凋亡
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