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目的通过过表达趋化因子受体4(CXCR4)基因修饰的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的建立,体外观察hUC-MSCs细胞迁移,探讨SDF1α-CXCR4轴介导的hUC-MSCs细胞迁移,以证实SDF1α-CXCR4在细胞迁移过程中的作用。方法提取Wistar大鼠大脑组织总RNA通过RT-PCR获取cDNA文库；据Genebank获得大鼠CXCR4编码区全长序列,按照慢病毒载体酶切位点,设计CXCR4上下游引物,通过聚合酶联反应(PCR)获得CXCR4基因片段,与双酶切线性化的慢病毒载体质粒(pCDHl-MCS-EF1-copGFP)连接,完成过表达CXCR4的慢病毒载体质粒(pCDH1-CXCR4-EF1-copGFP)的构建;包装慢病毒,并采用流式细胞仪测定慢病毒滴度；利用慢病毒感染hUC-MSCs,建立过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞群(Lenti-GFP-CXCR4-hUC-MSCs);采用Transwell实验观察细胞群迁移,并进行统计学分析。结果Wistar大鼠cDNA文库构建成功,通过PCR扩增获得大鼠CXCR4基因片段为1050bp,与pCDH1-MCS-EF1-copGFP连接成功,转化获得过表达CXCR4的慢病毒载体质粒pCDH1-CXCR4-EF1-copGFP,包装携带GFP的过表达CXCR4的第三代慢病毒成功,滴度为7.89x105TCID50/mL。可感染hUC-MSCs获得Lenti-GFP-CXCR4-hUC-MSCs,荧光显微镜观察示GFP表达可超过90%,经体外培养传代,Real time-PCR及Vestern blot检测CXCR4表达持续增高,且不随传代次数增加而降低,与感染前hUC-MSCs相比有统计学差异。Transwell小室检测证明随着SDF1α浓度增高,Lenti-GFP-CXCR4-hUC-MSCs迁移率比hUC-MSCs迁移率逐渐增高,p<0.05,有统计学差异。SDF1α的趋化作用可被CXCR4的特异性抑制剂AMD3100阻断。结论过表达CXCR4慢病毒可感染hUC-MSCs; Lenti-GFP-CXCR4-hUC-MSCs CXCR4mRNA及蛋白表达含量均持续增高；SDF1α主要通过CXCR4发挥趋化作用,且细胞迁移率呈现出SDF1α浓度依赖性,这种趋化作用可被AMD3100阻断；本实验采用体外实验,排除SDF1α之外的非研究因素影响,更具针对性研究SDF1α-CXCR4轴介导的hUC-MSCs靶向细胞迁移,为hUC-MSCs靶向细胞迁移修复组织损伤提供理论基础和实验依据。