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目的：肾细胞癌（Renal cell carcinoma,RCC）是发病率最高的泌尿男生殖系统肿瘤之一,在所有成人肿瘤中约占3%。其中肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）约占全部RCC的70%,是最为常见的病理亚型。ccRCC侵袭性强,约1/3的初诊患者即发现转移,预后不佳。探索ccRCC恶性进展的分子机制是提高患者生存率的重要手段。本研究利用生物信息数据库筛选出中心体蛋白55（centrosomal protein 55,CEP55）在ccRCC中表达升高且与患者不良预后相关,并对其在ccRCC进展中的作用及其分子机制进行研究。以期为揭示ccRCC恶性进展的分子机制提供有价值的实验依据。研究方法：1、使用R语言对GEO及TCGA数据库中ccRCC数据进行生信分析,筛选出ccRCC中关键分子CEP55,并研究其在ccRCC中的表达情况及预后价值。2、通过RealTime PCR、Western blot检测CEP55在组织及细胞中RNA及蛋白水平的表达情况。3、利用免疫组化法检测ccRCC组织芯片中CEP55的表达及小鼠皮下移植瘤中Ki-67的表达。4、利用慢病毒及sh RNA质粒在细胞中调控CEP55的表达;利用mimics和inhibitor在细胞中调控let-7g-5p的表达;利用si RNA在细胞中敲降RPS15A的表达。5、利用CCK8、克隆形成、划痕愈合及Transwell实验检测细胞的增殖及迁移能力。6、双荧光素酶基因报告实验检测let-7g-5p与CEP55 3’-UTR的结合能力。7、通过小鼠皮下成瘤实验研究CEP55在体内肿瘤生长中的作用。8、质谱分析法检测细胞中与CEP55结合的蛋白。9、免疫共沉淀方法验证细胞中CEP55和RPS15A的结合情况。10、免疫荧光法检测CEP55和RPS15A在细胞中的定位。结果：第一部分,1、通过对GEO数据库中GSE46699、GSE36895、GSE53000和GSE53757四个ccRCC数据集分析发现CEP55在ccRCC中表达升高。TCGA中数据验证了上述结论且进一步发现CEP55高表达预示着ccRCC患者预后不佳。2、通过12对ccRCC配对标本检测发现CEP55无论是m RNA水平还是蛋白水平,CEP55在ccRCC组织中表达均高于癌旁正常肾组织。150例ccRCC组织芯片免疫组化结果显示CEP55高表达的患者平均生存期较低表达患者明显缩短。第二部分,1、CEP55在ccRCC细胞中表达高于正常肾小管上皮细胞高。2、过表达CEP55后ccRCC细胞的增殖及迁移能力显著增强;反之敲降CEP55表达后ccRCC细胞的增殖及迁移能力明显减弱。过表达CEP55后ccRCC细胞在免疫缺陷小鼠体内增长速度更快,且移植瘤内Ki-67表达更高。3、多个生信数据库预测let-7g-5p可能是CEP55上游调控的mi RNA。12对ccRCC配对标本检测发现let-7g-5p在ccRCC中表达显著低于其配对癌旁正常肾组织。统计分析发现在ccRCC组织中let-7g-5p的表达与CEP55 m RNA表达呈负相关。4、在ccRCC细胞中利用mimics过表达let-7g-5p,发现无论是m RNA水平还是蛋白水平CEP55均显著降低。在ccRCC细胞中利用inhibitor敲降let-7g-5p,则CEP55 m RNA水平和蛋白水平表达均显著升高。双荧光素酶基因报告实验发现ccRCC细胞中let-7g-5p可以结合野生型CEP55 3’-UTR,降低荧光素酶基因产生的荧光强度。5、let-7g-5p可以抑制ccRCC细胞增殖和迁移,而这一过作用可以被CEP55过表达所回复。第三部分,1、免疫共沉淀物行质谱分析筛选出RPS15A是与CEP55结合的关键分子。TCGA数据库分析显示RPS15A m RNA在ccRCC组织中高表达,且与CEP55 m RNA表达呈正相关。12对ccRCC配对标本检测发现,RPS15A m RNA在ccRCC组织中表达较其配对癌旁正常肾组织显著升高。2、使用si RNA在ccRCC细胞中敲降RPS15A可以显著抑制细胞的增殖及迁移能力。3、在ccRCC细胞中CEP55和RPS15A在细胞质中共定位,CEP55与RPS15A直接结合并在转录后水平调控RPS15A的表达。4、在过表达CEP55的ccRCC细胞中敲降RPS15A减弱了CEP55促进ccRCC细胞增殖、迁移及其激活AKT信号通路的能力。结论：1、CEP55在ccRCC表达异常升高且预示着患者预后不良。2、CEP55促进ccRCC细胞增殖、迁移并在体内促进肿瘤生长。3、在ccRCC中CEP55上游受let-7g-5p调控,let-7g-5p通过mi RNA经典途径靶向结合CEP55 3’-UTR区降解CEP55,调控ccRCC增殖和迁移。4、CEP55与RPS15A相互作用通过触发AKT信号通路促进ccRCC进展。