【摘 要】
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苦瓜(Momordica charantia L.)为葫芦科苦瓜属1年生攀援草本植物,具有药食两用等特点,栽培面积和消费量很大,是世界各国普遍栽培的重要蔬菜作物之一。离体培养是苦瓜进行无性繁
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苦瓜(Momordica charantia L.)为葫芦科苦瓜属1年生攀援草本植物,具有药食两用等特点,栽培面积和消费量很大,是世界各国普遍栽培的重要蔬菜作物之一。离体培养是苦瓜进行无性繁殖和种质资源保存的有效途径,也是进行基因转化研究的基础。本文以田间选择得到的成年“碧秀”苦瓜优株枝条的茎段和顶芽为材料,对影响苦瓜离体培养的诸因素进行了系统的研究,成功建立了苦瓜离体茎段直接不定芽途径再生体系,获得再生植株。主要结果如下:(1) 0.1%升汞(HgCl2)处理6-8min为苦瓜外植体最佳消毒时间;外植体的最佳取材时间为6~7月,其次为5月;取材部位选择苦瓜枝条的第3~5节茎段,1.0 cm长度带一个节间,即我们定义的中部枝条。(2)适当高浓度的6-BA有利于苦瓜不定芽萌动,但同浓度KT不适于不定芽萌动。筛选出直接不定芽诱导最佳培养基为:MS+BA4.0 mg╱L+IBA0.1mg╱L,直接不定芽诱导率达41.46%。(3)附加丝瓜伤流液,可以显著提高芽体的启动时间及萌发率,浓度为10%(v/v)时,萌动率达61.21%,萌动时间仅为6d。(4)继代增殖试验中通过增殖倍数、平均株高分析表明苦瓜茎段的最佳增殖培养基为:MS+BA1.0mg╱L+KT1.0mg╱L+IBA0.1mg/L。(5)添加硝酸银(AgNO3)后,增殖系数大大增加,植株株高却受到抑制,AgNO3浓度为1.0mg╱l,增殖系数可达6.09。(6)不定芽增殖系数随着活性炭(AC)的加入而显著下降,但AC对于不定芽的伸长具有明显的促进作用。(7)丝瓜伤流液在提高增殖系数的同时也增加愈伤组织的发生量。不同碳源、水源对增殖影响不大,一定条件下,可以考虑自来水替代蒸馏水。(8)结合生根率、平均根数及平均根长,诱导苦瓜不定芽的最佳生根培养基为:1/2MS+IBA0.2或0.3mg/L+20g/L蔗糖。(9)添加AgNO3、AC并不能促进组培苗不定根的诱导。(10)以滤纸和丝瓜瓤作为支持体的液体培养使萌根时间显著缩短,但此条件下形成的根系脆性大,移栽时容易发生断根。
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