在本实验中，运用mRNA DD-PCR技术，以细胞株GC7901与GES-1为研究对象，采用Liang与Pardee改进的第三代引物，摸索并建立了差示PCR的优化条件，建立的条件为：前5轮采用94℃35S，40℃ 2min，72℃ 30S，后35轮循环采用94℃35S，55℃ 2min，72℃ 1min，最后在72℃延伸7min。运用建立的条件，进行了差示PCR，扫描确定并分离回收了差异条带154条，胃癌细胞株泳道中存在而胃粘膜细胞株泳道中缺失的有82条；胃粘膜细胞株泳道中存在而胃癌细胞株泳道中缺失的有35条；胃癌细胞株泳道中表达高于胃粘膜细胞株泳道中的有23条；胃粘膜细胞株泳道中表达高于胃癌细胞株泳道中的有14条；分别来自于H-T₁₁G、H-T₁₁C、H-T₁₁A锚定引物的差异条带为61条、47条、46条。 从筛出的片段中随机挑取了17个差异条带（命名为GCYS-1至17）作探针，与细胞株GC7901及GES-1总RNA进行打点杂交，结果证实17个片段在两个细胞株之间呈差异表达。采用PCR产物直接测序及全自动测序技术获取了17个差异片段序列，利用计算机网络对序列进行GenBank同源性检索分析，发现GCYS-4、5、6、13四个序列为新序列，其余13个序列与GenBank中序列有部分同源，其中GCYS-17序列与HEK-5 3’端序列有97％同源性，与ERK序列有97％同源性。 针对获取的序列重新设计了16对引物，第17对引物采用ERK引物，计算机分析表明这17对引物具有特异性。利用RT-PCR方法对细胞株、新鲜组织标本、血标本进行了检测。结果表明：通过对GES-1及GC7901细胞