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目的:通过观察二甲双胍(Merformin)对于子宫内膜癌Ishikawa细胞系中的REDD1(发育及DNA损伤反应调节基因1)、p-AKT ser473(473丝氨酸残基磷酸化AKT)、AKT(蛋白激酶B)蛋白表达、AKT蛋白磷酸化程度和REDD1、AKT、mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)mRNA水平的影响进行分析,并对可能存在的REDD1及AKT/mTOR信号通路之间的相互作用与影响进行研究,探讨二甲双胍对于子宫内膜癌Ishikawa细胞迁移能力的影响及REDD1、p-AKT及mTOR信号分子在其中发挥的作用。方法:选取适量子宫内膜癌Ishikawa细胞株置于37℃、5%CO2环境的培养箱内进行复苏培养,采用含有10%FBS的RPMI1640培养液进行细胞培养,当细胞达到汇片程度时,按照5×105个/瓶将细胞接种于25cm2的培养瓶中,观察Ishikawa细胞的生长情况,以后每隔2天更换一次细胞培养液。当Ishikawa细胞的体积达到90%以后,将其放置于不含有血清的RPMI1640培养液中培养12h,再分别使用1mmol/L、5mmol/L和10mmol/L的二甲双胍进行药物干预48h。同时使用等体积无血清的RPMI1640培养液作为对照组。将Ishikawa细胞按照不同干预分组进行Transwell迁移小室和细胞划痕法检测,以了解不同浓度二甲双胍对Ishikawa细胞迁移能力影响的差异,同时提取各组细胞的RNA及总蛋白,分别采用实时荧光定量PCR和Westem-blot蛋白电泳对各组REDD1、AKT、mTOR mRNA表达、REDD1、AKT、p-AKT蛋白表达的程度进行检测。结果:1、二甲双胍能够明显抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的迁移能力,同时其抑制程度随着二甲双胍浓度增加而增大,当二甲双胍浓度达到10mmol/L时,其对细胞迁移能力的抑制作用最强,差异有统计学意义(P<0.05)。2、不同浓度的二甲双胍作用于Ishikawa细胞以后,能明显提高REDD1/mTOR信号通路中REDD1的表达,分别是对照组的2.97倍、3.25倍、4.87倍,二甲双胍浓度1mmol/L组与对照组、10mmol/L组与其它组之间差异有统计学意义(P<0.05)。AKT mRNA的表达分别是对照组的1.10倍、1.02倍、1.00倍,差异没有统计学意义(P<0.05)。同时能明显下调其下游mTOR基因的表达,分别是对照组的0.70倍、0.54倍、0.37倍,二甲双胍浓度1mmol/L组与对照组、10mmol/L组与其它组之间差异有统计学意义(P<0.05)。3、二甲双胍能够明显增加REDD1/AKT/mTOR信号通路中的REDD1蛋白的表达,同时还可对AKT磷酸化水平即p-AKT蛋白的表达进行抑制,但对AKT蛋白的表达无明显影响。p-AKT的表达分别是对照组的0.70倍、0.51倍、0.20倍,而且10mmol/L组的二甲双胍抑制能力最强,差异具有统计学意义(P<0.05)。REDD1蛋白的表达分别为对照组的3.05倍、5.51倍、11.92倍,也呈现出剂量依赖的趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。AKT的磷酸化水平(P-AKT/AKT比值)也有较明显的下降,AKT的磷酸化水平分别是对照组的0.62倍、0.36倍、0.15倍。AKT蛋白的表达分别是对照组的1.06倍、1.03倍、1.07倍,差异没有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲双胍在作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞后,可以抑制子宫内膜癌细胞的迁移能力,且抑制程度随着二甲双胍浓度的上升而增强;能够上调子宫内膜癌细胞内REDD1的表达,抑制mTOR表达,同时还可下调AKT磷酸化水平,这些效应均具有剂量依赖性。而REDD1/mTOR与AKT/mTOR信号通路可能是调节子宫内膜癌细胞迁移侵袭能力的关键细胞信号网络靶点。二甲双胍可能通过REDD1及AKT/mTOR信号通路的交互作用来抑制REDD1的表达,下调AKT的磷酸化水平进而抑制mTOR的表达,最终发挥出二甲双胍在Ishikawa细胞系中的抗肿瘤细胞迁移侵袭的作用。