黄精中甾体皂苷的分离和结构鉴定

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黄精(Polygonatum sibiricum Redoute)系百合科(Liliaceae)黄精属多年生草本植物,为卫生部认可的药食两用资源,具有降血脂、抗肿瘤和抗菌等临床功效。为了黄精的进一步开发和利用,我们对黄精的主要活性成份甾体皂苷的化学组成作了系统的研究,并初步探讨了黄精总皂苷和分离所得的主要化合物对高血脂小鼠的降血脂功效。主要研究内容如下:1.称取25kg黄精,粉碎过20目,按1:7(kg?L-1)料液比,用体积分数70%的乙醇回流提取3次,每次2h。将提取液过滤后,减压蒸馏至无乙醇得黄精乙醇提取物。将乙醇提取物用石油醚萃取脱脂,直至石油醚层无色。将脱脂后的物质用正丁醇萃取多次,直到正丁醇相无色。合并正丁醇相,蒸发至无正丁醇,即得正丁醇提取物。将黄精的正丁醇提取物用大孔树脂分离,用水、20%、40%、50%、75%和95%乙醇洗脱。流出液用薄层色谱法进行检测,根据显色、Rf值和保留时间不同,分成A、B、C、D、E、F、G、H、I九部分。将主要含甾体皂苷的部分G、H和I部分用聚酰胺分离,除去荧光物质,得主要含皂苷的部分2。聚酰胺流出物含皂苷的2部分用ODS进一步分离,得2-1、2-2、2-3段。将各段分别用ODS和MCI柱色谱进行分离、纯化,最终从黄精的正丁醇提取物中分离出了四个化合物。2.运用1H-NMR、13C-NMR、135DEPT-NMR技术对四个化合物的结构进行鉴定,对结果进行分析后得四个化合物分别是:薯蓣皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷和薯蓣皂苷元其中皂苷Ⅰ和Ⅲ在黄精中未见报道。3.通过高血脂症小鼠模型对黄精总皂苷和主要化合物Ⅱ的降血脂功效进行了初步的研究,分析小鼠的总胆固醇(TC)和甘油三脂(TG)后发现:黄精总皂苷对小鼠TC和TG无显著影响,但化合物Ⅱ能显著降低高血脂小鼠的TC和TG(p<0.05)。
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