油茶籽粕抑菌活性物分离纯化与活性研究

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油茶籽粕即油茶籽榨油后剩下的饼粕,是茶油生产过程中具有重要利用价值的工业副产物。我国是世界上油茶籽产量最大的国家,目前油茶籽粕并未得到很好的利用,大多直接作清塘剂、燃料使用,造成了很大的资源浪费和环境污染。研究发现油茶籽粕具有明显抑菌作用,国内外对油茶籽粕中抑菌物质缺少系统的研究。本文研究了茶粕中的活性物质的分离纯化、抑菌活性及稳定性,为油茶籽粕中抑菌活性成分的开发利用和油茶籽粕提取物的深加工提供理论依据。  1、对油茶籽粕提取物抑菌活性初步研究表明,油茶籽粕中醇提物的的抑菌活性最强,对供试菌株抑菌效果革兰氏阳性菌>革兰氏阴性菌>霉菌;通过二倍梯度稀释法和刃天青法测定最低抑菌浓度(MLC)发现,其醇提物对细菌和霉菌的最低抑菌浓度为30~500μg/mL之间,具有较好的抑菌活性。  2、研究了油茶籽粕中具有抑菌活性物质的最佳提取工艺。以对黑曲霉、黑根霉抑菌活性为指标,探讨乙醇浓度、料液比、温度、提取时间对抑菌活性物质的影响,在单因素基础上并采用正交试验确定了对黑曲霉抑菌活性组分提取的最佳工艺条件。结果表明,油茶籽粕中抑菌活性物质的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度80%,提取温度80℃,液固比15:1,提取时间4h。  3、油茶籽粕提取物的抑菌活性物质稳定性的研究。结果表明,对热较稳定,在短时间内能耐较高温度;在pH为6.0作用相对稳定,且在酸性环境下较碱性条件下稳定;在不同时间光照以及紫外光照射下均具有稳定的抑菌活性;在Na+、K+、Ba2+、Mg2+、Ca2+及Fe3+溶液中表现出较为稳定的抑菌活性。  4、油茶籽粕提取物经萃取后,经活性检测活性最强部分为正丁醇萃取层;对正丁醇层进行活性跟踪方法进行大孔吸附树脂柱层析、正相硅胶柱层析等分离得到活性最强部分通过分析推测为油茶皂甙且对其进行MIC测定,结果表明正丁醇层具有广谱、良好的抑菌活性,且抑菌效果明显优于粗提物;另外分离得到两个黄酮类单体,通过鉴定为山奈酚3-O-{β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-[α-L-鼠李糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷}和山奈酚3-O-{β-D-吡喃木糖-(1-2)-[α-L-鼠李糖-(1→6)]-B-D-葡萄糖苷}。
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