环链棒束孢广泛存在于自然界,并且在植物病虫害防治中起重要作用,目前相关的研究多集中于生物学特性及杀虫活性的研究,对环链棒束孢发酵液中的化学物质研究甚少,本论文在此方向进行了初步探究。对环链棒束孢的发酵培养基进行了优化,利用有机溶剂法提取、分离纯化技术鉴定次生代谢产物中的挥发性物质,并在农药库中对比出三种有毒物质。通过本研究,为环链棒束孢次生代谢产物的化学指纹图谱和生物杀虫剂的开发利用提供数据的支撑,以期提高其市场开发价值。本论文取得的主要结果总结如下:1、在单因素试验的基础上进行正交试验,优化环链棒束孢H-12-1液体发酵培养基,作为实验的初始发酵培养基配方。测定了碳源、氮源和微量元素对所得菌丝体干重的影响,最终得到最佳培养基为:葡萄糖20 g/L,酵母浸粉30 g/L,硫酸镁0.4 g,最佳条件下菌丝体干重为13.1 g/mL。2、本实验分别选用PDA培养基、沙氏培养基和CMA培养基作为环链棒束孢H-12-1的发酵培养基,统一发酵培养5 d后,离心发酵液所得菌丝体中,PDA培养基的菌丝干重最高,为0.223 g/mL,沙氏培养基的菌丝干重为0.179 g/mL,CMA培养基的菌丝干重最低,为0.008 g/mL。结果表明:PDA培养基为此菌株的最适发酵培养基。3、本实验选取石油醚、乙酸乙酯和乙醇/水作为萃取剂依次对3种发酵液进行分级萃取,并对两个有机相(石油醚相和乙酸乙酯相)做定量分析。其中以PDA培养基乙酸乙酯相的提取量最高,为0.1104 g/mL;沙氏培养基乙酸乙酯相提取量为0.0886 g/mL;CMA培养基乙酸乙酯相提取量为0.022 g/mL;CMA石油醚相提取量为0.0147 g/mL;沙氏石油醚相提取量0.0142 g/mL;PDA石油醚相提取量0.0103 g/mL。结果表明:乙酸乙酯作为萃取剂所得提取量最高,说明乙酸乙酯溶剂与环链棒束孢发酵液中的次生代谢产物有更好的溶解性。4、本实验采用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)对所得有机相(石油醚相和乙酸乙酯相)进行挥发性成分检测,共鉴定出151种成分,其中沙氏石油醚相分离鉴定出的物质最多,以烷烃类化合物为主,达到30种;沙氏乙酸乙酯相主要由酮类和酯类组成;PDA石油醚相中芳香族化合物有6种,还有有机酸等化学物质;PDA乙酸乙酯相主要由酯类和酮类化合物组成;CMA石油醚相由酚类和酯类物质组成;CMA乙酸乙酯相主要化合物为烯烃和酮类,结果表明:同一菌株于不同培养基发酵,得到的代谢产物在种类上是不同的。每个组分都含有酯类化合物,说明在发酵过程中进行了一系列的羧酸与醇的氧化反应,导致大量的酯类积累。小分子的芳香族、有机酸、酯类等均容易挥发,并常伴有一定的气味,这与环链棒束孢发酵液呈现特殊的气味有一定原因。5、本实验借助超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法(UPLCH-QTOF G2-XS)对乙醇/水相进行成分分析,本文根据所得母离子的质量数做二级质谱,得到碎片离子,再根据碎片离子推测结构式和官能团,最后将结构式的mol文件用软件验证,将所得结构式在农药库里匹配到3种具有杀蚜活性的物质。分别是环戊烯丙菊酯、diofenolan(苯虫醚)、瓜叶菊素I。