益智抑菌特性研究及成分分析

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本文旨在研究益智活性成分的抗菌活性和应用,用超声微波协同萃取法,结合柱色谱、液相色谱、气相色谱分析研究了益智活性成分的分析,并将益智提取物应用于热带作物芒果及罗非鱼保鲜中。具体工作如下:1.益智抑菌活性物质提取工艺的优化为了确定提取的最优因素条件,首先筛选提取溶剂,建立提取前浸泡过程的动力学模型,以为大肠杆菌为指标菌,采用BoxBenken组合设计优化超声微波联合提取工艺。研究结果表明:各因素对益智抑菌活性物质提取的影响强弱依次为:溶剂浓度>液料比>提取温度>提取时间,最佳的提取浓度73.3%,提取温度54.4℃C,液料比15.2mL/g,提取时间45.6min。2.益智活性成分分析对益智中的酚类进行液相分析,发现益智中存在儿茶素,绿原酸,芦丁,丁香酸,鞣花酸等成分;对益智油进行了GC-MS分析。最佳提取条件下的益智提取物经萃取分离后,硅胶柱层析分离石油醚相及乙酸乙酯相,分别以石油醚/乙酸乙酯、氯仿/甲醇、乙酸乙酯/甲醇为洗脱剂,得到石油醚相10:1及乙酸乙酯相19:1部分的抑菌效果同相其它组分相比较好,其中石油醚相10:1部分抑菌活性相对较强。通过GC-MS分析,石油醚相10:1部分主要成分是5-甲酰甲基-6-烃基-3,3-二甲基-乙烯基-[3,2,0]二环二庚酮(含量为15.23%),2,6,6-三甲基-1-环己烯基-1-乙醛(含量为18.82%)。乙酸乙酯19:1部分主要成分是4-(2,6,6-三甲基环己烯-1-烯基)-丁酸(含量为13.85%),琥珀酸单甲酯(含量为14.56%),二甲亚砜亚甲基叶立德(含量为18.44%),2,4,5,6,7,7-六元环-4,4,7a三甲基-1氢茚酚(含量为20.28%)。3.益智抑菌活性的测定经测定最佳提取条件下益智提取物的MIC值及稳定性,发现益智提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌及黑曲霉有较好抑菌效果,且具有较好的耐热、耐pH及耐受紫外线照射的抑菌性能。并采用生长曲线测定及扫描电镜观察实验方法初步研究提取物的抑菌机理。试验结果表明益智提取物会抑制菌类对数生长期时的生长,破坏菌体的细胞结构,最终抑制大肠杆菌生长。4.益智提取物应用于芒果、罗非鱼的保鲜(1)益智提取物应用于罗非鱼的保鲜首先对以益智提取物、壳聚糖和乙酸为原料的复合保鲜液进行BoxBenken组合设计优化,确定益智提取物0.94%,壳聚糖为0.88%,乙酸为0.6%时为最佳配比。采用最佳配比对罗非鱼进行保鲜,测定pH, TVB-N及TBA值,并进行感官评分,与对照组比较可以涂膜可明显延长罗非鱼货架期长达6d。(2)益智提取物应用于芒果的保鲜为了研究益智提取物应用于芒果保鲜以益智提取物、β环糊精(1:4)与2%海藻酸钠为材料对芒果进行涂膜保鲜,并以空白涂膜及1%壳聚糖溶液涂膜作为对照组。试验结果表明复合配比组芒果总失重率为12.85%,与空白组比较,复合涂膜组的失重率、腐烂指数、转黄指数、可溶性固形物含量、丙二醛含量分别低了22.33%、46.67%、33.00%、8.74%、52.20%,VC损失减少了69.19%,总酚含量提高了51.06%,说明复合涂膜能提高芒果品质,延缓后熟进而延长保鲜期。
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